高保真RT-PCR试剂盒PrimeScript High Fidelity RT-PCR Kit

机构用户解决方案

产品选择指南

PCR·等温扩增

PCR Enzyme的选择 PCR原理说明高成功率PCR优选酶：TaKaRa Ex Premier 高保真酶：PrimeSTAR系列基本PCR：Taq、Ex Taq、LA Taq系列无需提取的直接PCR：MightyAmp系列菌落PCR、预混染料的PCR酶等温扩增酶特殊用途：多重PCR，防污染等高端PCR酶（Clontech） DNA PCR相关制品 RT-PCR试剂盒具备反转录活性的PCR酶：TaKaRa Tth PCR仪器
定量PCR相关制品

qPCR套装 qPCR学习中心反转录反应（qPCR专用）反转录反应试剂(Clontech) 嵌合荧光法检测(Takara) 嵌合荧光法检测(Clontech) miRNA 嵌合荧光法检测探针检测 Cycleave探针检测 qPCR－仪器 qPCR Primer qPCR－RNA/DNA的制备
RNA合成·体外转录

RNA合成相关单品酶 RNA相关修饰酶 RNA合成模板制备 RNA合成试剂盒及解决方案 mRNA无细胞表达什么是mRNA生产用酶的质量等级？用于mRNA生产的酶（HQ级）用于mRNA生产的酶（GMP级）
cDNA合成 & 克隆

克隆学习中心 DNA Ligation TA克隆和平滑末端克隆 In-Fusion无缝克隆 cDNA合成&文库构建 SMART全长cDNA合成&文库构建 Random Mutagenesis Site-Directed Mutagenesis 基因组DNA序列调取试剂盒 Vector（克隆用）感受态细胞修饰酶/Ligases 修饰酶/磷酸酶、激酶修饰酶/DNA & RNA Polymerase 修饰酶/焦磷酸酶修饰酶/RTase、RNase Inhibitor 修饰酶/核酸酶、拓扑异构酶 Nucleotide Buffer（Powder）etc. 什么是mRNA生产用酶的质量等级？用于mRNA生产的酶（HQ级） Others（基因工程相关制品）
NGS相关制品

NGS 学习中心空间组学 mRNA-Seq Total RNA-Seq 单细胞 DNA-Seq DNA-Seq 生殖健康表观遗传学分析免疫库分析单细胞分选系统 NGS关联制品 PCR酶（NGS用）
自动化系统

自动化学习中心单细胞分选系统Shasta及其应用单细胞分选系统ICELL8 cx及其应用高通量Real-Time PCR系统高通量单细胞分选系统ICELL8应用
核酸提取、纯化及DNA标记

DNA片段、质粒DNA纯化基因组DNA纯化试剂(柱式法) 基因组DNA纯化试剂(试剂型) RNA提取、纯化试剂(柱式法) RNA提取、纯化试剂(试剂型) RNA保存试剂 Small RNA提取试剂病毒核酸纯化试剂盒酵母核酸纯化试剂盒核酸提取及纯化制品-Others DNA标记标记DNA-蛋白质的回收
限制酶

限制酶基本信息常规限制酶系列产品 QuickCut限制酶 RNA限制酶
电泳相关制品

核酸染料 DNA Markers RNA Markers 蛋白质Markers Agarose Loading Buffer 常用缓冲液方便装电泳相关装置
蛋白质互作研究（酵母杂交系统）

Takara酵母杂交学习中心 Matchmaker^® Gold酵母双杂系统 Matchmaker^® Gold酵母单杂系统互作的确认和评价 Matchmaker相关制品
表达调节及蛋白质性能分析

iDimerize^™蛋白质互作诱导系统 ProteoTuner^™蛋白质调节系统 Tet诱导表达系统
蛋白质表达相关制品

E.coli蛋白质表达 Brevibacillus/Bacillus蛋白质表达哺乳动物细胞蛋白质表达昆虫细胞蛋白质合成(Clontech) 无细胞蛋白质合成系统 Protein Refolding
蛋白质纯化、分析和检测

Capturem新型膜技术应用蛋白质样品制备 His标签融合蛋白质纯化 GST标签融合蛋白质纯化生物素标签融合蛋白质纯化 DYKDDDDK标签融合蛋白质纯化 Myc标签融合蛋白质纯化抗体纯化蛋白质IP&Co-IP 糖/磷酸化蛋白质纯化蛋白质检测蛋白质电泳胶染色蛋白质定量蛋白酶（His标签去除）蛋白酶（氨基酸序列分析）
基因导入（Virus、Vectors）

病毒基因传递系统选择向导重组慢病毒(Lentivirus)制品重组逆转录病毒(Retrovirus)制品重组腺相关病毒(AAV)制品重组腺病毒(Adenovirus)制品哺乳动物细胞用载体酵母、丝状真菌用载体植物用载体
转染试剂

Xfect转染试剂选择向导质粒转染试剂 RNA转染试剂 Protein转染试剂
干细胞研究相关制品

干细胞学习中心干细胞基因操作 (Cell reprogramming) 细胞 (Cell) 细胞培养产品 (Cell culture) 抗体 (Antibodies) 分化试剂盒和多能性监测 (Pluripotency and Differentiation )
表观遗传学相关制品

甲基化DNA富集相关制品 PCR/qPCR相关制品 Control Genome DNA 甲基化DNA相关酶制品亚硫酸氢盐处理相关制品
基因组编辑相关制品

CRISPR/Cas9 Cre重组酶基因敲入用长单链DNA制备
荧光蛋白质 & 报告系统

荧光蛋白质按颜色、名称分类荧光蛋白质按用途分类荧光蛋白质相关制品报告系统
抗体 & ELISA & 细胞信号转导

细胞增殖、细胞毒性测定细胞凋亡（Takara）细胞凋亡（Clontech） EIA试剂盒（Takara）免疫染色关联制品细胞信号转导（Clontech）酶活性测定试剂盒脂肪细胞、骨细胞分化试剂抗体（Takara）
细胞 & 培养相关制品

细胞培养相关制品细胞生物学检测试剂细胞解冻仪器
microRNA & RNAi研究相关制品

提取及纯化制品 microRNA定量PCR miRNA表达 Small RNA克隆 shRNA表达检测合成siRNA定量 RNAi相关制品
Library & cDNA & RNA

Human cDNA libraries series Rat cDNA libraries series cDNA、Genome DNA Total RNA & Poly A⁺ RNA
糖工学相关制品

糖工学酶糖工学试剂盒 Glycosphingolipid解析试剂
应用检测（食品-环境-人）

活菌DNA检测相关制品防污染相关制品食物中毒检测（PCR）食物中毒检测 (Real Time PCR) 食物中毒检测 (按Target选择) 肉种鉴定相关制品水质检测人感染症检测菌种鉴定支原体检测
仪器相关制品

PCR仪器支持中心 Q-PCR仪 E-PCR仪电泳仪器产品
Clontech相关组分信息表

Clontech相关组分信息表

技术服务信息

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高保真RT-PCR试剂盒PrimeScript^™ High Fidelity RT-PCR Kit
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	R022A	PrimeScript^™ High Fidelity RT-PCR Kit	50 Rxns	￥1,392
Takara	R022B (A × 4)	PrimeScript^™ High Fidelity RT-PCR Kit	50 Rxns × 4	￥5,012

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■ 制品内容 (Code No.: R022A : 50 次量^*1)

PrimeScript RTase (for 2 step)	25 μl
5×PrimeScript Buffer	200 μl
RNase Inhibitor (40 U/μl)	25 μl
dNTP Mixture (10 mM each)	50 μl
Oligo dT Primer (2.5 μM)	50 μl
Random 6 mers (20 μM)	50 μl
PrimeSTAR Max Premix (2×)	625 μl × 2
Control F-1 Primer^*2 (20 μM)	10 μl
Control R-1 Primer^*3 (20 μM)	10 μl
Positive Control RNA (2×10⁵ copies/μl)	20 μl
RNase Free dH2O	1 ml

1 反转录反应20 μl、PCR反应50 μl，2 Step RT-PCR时可使用50次。 2 Positive Control RNA用上游引物。 *3 Positive Control RNA用下游引物。

Limited Use Label License: [M54]

■ 制品说明

PCR (Polymerase Chain Reaction；聚合酶链式反应) 是一种体外扩增目的DNA的方法。虽然原理上PCR法是扩增DNA，RNA不能直接被扩增，但是经过反转录酶的作用将RNA反转录成cDNA后进行扩增 (RT-PCR)，PCR法便可应用于RNA的解析了。目前，此方法已广泛应用于RNA的构造解析、cDNA的克隆及RNA水平上的表达解析等多种领域。
PrimeScript High Fidelity RT-PCR Kit是一种对Total RNA及mRNA合成cDNA时具有高保真性的RT-PCR用试剂盒。
本试剂盒中使用的反转录酶是Takara改良的M-MLV新型反转录酶PrimeScript RTase，PCR时使用了对cDNA扩增时具有很高保真性的DNA聚合酶PrimeSTAR MAX DNA Polymerase。因PrimeSTAR MAX是兼具高保真性与高扩增效率的预混型酶，模板浓度适用范围广，可用于高保真性的cDNA克隆等重要反应中。
2 Step RT-PCR作为本试剂盒的标准操作流程，2 Step RT-PCR操作流程具有以下优点:
1. 能够高效率地获得高保真性的RT-PCR扩增产物。
2. 在42℃条件下反转录反应也可以使具有复杂结构的RNA进行良好的延伸。
3. 反应体系中Total RNA的使用范围非常宽广，便于使用。
本试剂盒含有反转录反应及PCR扩增反应所需要的全部试剂。并且，也可以进行1 Step RT-PCR反应。

■ 保存

-20℃。
注意：PrimeSTAR MAX Premix (2×) 反复冻融25次后，已确认其活性没有发生改变，但要注意尽量避免冻融次数过多。

■ 试剂盒特点

使用2 Step RT-PCR标准操作流程时

RNA模板	适用于所有RNA
扩增片段大小	6 kb产物
反转录酶	PrimeScript RTase (反应温度在42℃)
DNA Polymerase	PrimeSTAR Max DNA Polymerase (2×premix)
RNase Inhibitor	必须使用 (Kit中含有)
1st strand cDNA合成用引物	Random 6 mers、Oligo dT Primer、特异性下游引物可供选择

使用1 Step RT-PCR操作流程时

RNA模板	适用于所有RNA
扩增片段大小	6 kb产物
反转录酶	PrimeScript RTase (反应温度50℃)
DNA Polymerase	PrimeSTAR Max DNA Polymerase (2×premix)
RNase Inhibitor	必须使用 (Kit中含有)
1st strand cDNA合成用引物	使用特异性下游引物 (PCR扩增反应用反义链引物) (不可使用Random 6 mers及Oligo dT Primer)
操作	在同一个反应管中可连续进行RT-PCR反应

页面更新：2023-11-01 16:22:53

技术信息

操作方法

PrimeScript^™High Fidelity RT-PCR Kit的操作方法

实验案例

扩增片段长度确认（2 Step RT-PCR）模板量使用范围研讨（2 Step RT-PCR）扩增片段长度确认（1 Step RT-PCR）灵敏度检测（1 Step RT-PCR）