Takara


扩增片段长度确认（2 Step RT-PCR）


以人心脏Total RNA为模板，使用2 Step RT-PCR扩增Dystrophin基因不同长度的目的片段。

【方法】
按实验操作方法，在20 μl的反转录体系中，加入Total RNA 800 ng，使用Oligo dT Primer进行反转录反应。再以5 μl反转录反应液（相当于200 ng Total RNA）作为模板，进行50 μl体系的PCR扩增反应。

PCR反应条件
98℃ 10 sec.		30 cycles
55℃ 15 sec.
72℃ 1 min./kb

【结果】
6 kb以下的目的片段都得到了良好扩增。