新冠病毒qPCR检测

机构用户解决方案

产品选择指南

一般PCR相关制品

PCR Enzyme的选择 PCR原理说明高成功率PCR优选酶：TaKaRa Ex Premier 高保真酶：PrimeSTAR系列基本PCR：Taq、Ex Taq、LA Taq系列无需提取的直接PCR：MightyAmp系列菌落PCR、预混染料的PCR酶特殊用途：多重PCR，防污染等高端PCR酶（Clontech） DNA PCR相关制品 RT-PCR试剂盒具备反转录活性的PCR酶：TaKaRa Tth PCR仪器
等温扩增相关制品

等温扩增酶
定量PCR相关制品

qPCR学习中心 qPCR套装反转录反应（qPCR专用）反转录反应试剂(Clontech) 嵌合荧光法检测(Takara) 嵌合荧光法检测(Clontech) miRNA 嵌合荧光法检测探针检测 Cycleave探针检测 qPCR－仪器 qPCR Primer qPCR－RNA/DNA的制备
cDNA合成 & 克隆

克隆学习中心 DNA Ligation TA克隆和平滑末端克隆 In-Fusion无缝克隆 cDNA合成&文库构建 SMART全长cDNA合成&文库构建 Random Mutagenesis Site-Directed Mutagenesis 基因组DNA序列调取试剂盒 Vector（克隆用）感受态细胞修饰酶/Ligases 修饰酶/磷酸酶、激酶修饰酶/DNA & RNA Polymerase 修饰酶/焦磷酸酶修饰酶/RTase、RNase Inhibitor 修饰酶/核酸酶、拓扑异构酶 Nucleotide Buffer（Powder）etc. 用于mRNA生产的酶（HQ级） Others（基因工程相关制品）
NGS相关制品

NGS 学习中心单细胞 RNA-Seq 单细胞 DNA-Seq RNA-Seq DNA-Seq 生殖健康表观遗传学分析免疫库分析单细胞分选系统 NGS关联制品 PCR酶（NGS用）
自动化系统

自动化学习中心高通量单细胞分选系统ICELL8 cx 及其应用高通量Real-Time PCR系统自动化NGS文库制备系统高通量单细胞分选系统ICELL8应用
核酸提取、纯化及DNA标记

DNA片段、质粒DNA纯化基因组DNA纯化试剂(柱式法) 基因组DNA纯化试剂(试剂型) RNA提取、纯化试剂(柱式法) RNA提取、纯化试剂(试剂型) RNA保存试剂 Small RNA提取试剂体液样品exosome提取试剂病毒核酸纯化试剂盒酵母核酸纯化试剂盒核酸提取及纯化制品-Others DNA标记标记DNA-蛋白质的回收
限制酶

限制酶基本信息常规限制酶系列产品 QuickCut限制酶 RNA限制酶
电泳相关制品

核酸染料 DNA Markers RNA Markers 蛋白质Markers Agarose Loading Buffer 常用缓冲液方便装电泳相关装置
蛋白质互作研究（酵母杂交系统）

Takara酵母杂交学习中心 Matchmaker^® Gold酵母双杂系统 Matchmaker^® Gold酵母单杂系统互作的确认和评价 Matchmaker相关制品
表达调节及蛋白质性能分析

iDimerize^™蛋白质互作诱导系统 ProteoTuner^™蛋白质调节系统 Tet诱导表达系统
蛋白质表达相关制品

E.coli蛋白质表达 Brevibacillus/Bacillus蛋白质表达哺乳动物细胞蛋白质表达昆虫细胞蛋白质合成(Clontech) 无细胞蛋白质合成系统 Protein Refolding
蛋白质纯化、分析和检测

Capturem新型膜技术应用蛋白质样品制备 His标签融合蛋白质纯化 GST标签融合蛋白质纯化生物素标签融合蛋白质纯化 DYKDDDDK标签融合蛋白质纯化 Myc标签融合蛋白质纯化抗体纯化蛋白质IP&Co-IP 糖/磷酸化蛋白质纯化蛋白质检测蛋白质电泳胶染色蛋白质定量蛋白酶（His标签去除）蛋白酶（氨基酸序列分析）
基因导入（Virus、Vectors）

病毒基因传递系统选择向导重组慢病毒(Lentivirus)制品重组逆转录病毒(Retrovirus)制品重组腺相关病毒(AAV)制品重组腺病毒(Adenovirus)制品哺乳动物细胞用载体酵母、丝状真菌用载体植物用载体
转染试剂

Xfect转染试剂选择向导质粒转染试剂 RNA转染试剂 Protein转染试剂
干细胞研究相关制品

干细胞学习中心干细胞基因操作 (Cell reprogramming) 细胞 (Cell) 细胞培养产品 (Cell culture) 抗体 (Antibodies) 分化试剂盒和多能性监测 (Pluripotency and Differentiation ) 基因编辑（Gene Editing）
表观遗传学相关制品

甲基化DNA富集相关制品 PCR/qPCR相关制品 Control Genome DNA 甲基化DNA相关酶制品亚硫酸氢盐处理相关制品
基因组编辑相关制品

CRISPR/Cas9 Cre重组酶基因敲入用长单链DNA制备
荧光蛋白质 & 报告系统

荧光蛋白质按颜色、名称分类荧光蛋白质按用途分类荧光蛋白质相关制品报告系统
抗体 & ELISA & 细胞信号转导

细胞增殖、细胞毒性测定细胞凋亡（Takara）细胞凋亡（Clontech） EIA试剂盒（Takara）免疫染色关联制品细胞信号转导（Clontech）酶活性测定试剂盒脂肪细胞、骨细胞分化试剂抗体（Takara）
细胞 & 培养相关制品

细胞培养相关制品细胞生物学检测试剂细胞解冻仪器
microRNA & RNAi研究相关制品

RNA合成提取及纯化制品 microRNA定量PCR miRNA表达 Small RNA克隆 shRNA表达检测合成siRNA定量 RNAi相关制品
Library & cDNA & RNA

Human cDNA libraries series Mouse cDNA libraries series Rat cDNA libraries series cDNA、Genome DNA Total RNA & Poly A⁺ RNA
糖工学相关制品

糖工学酶糖工学试剂盒 Glycosphingolipid解析试剂
应用检测（食品-环境-人）

活菌DNA检测相关制品防污染相关制品食物中毒检测（PCR）食物中毒检测 (Real Time PCR) 食物中毒检测 (按Target选择) 肉种鉴定相关制品水质检测人感染症检测菌种鉴定支原体检测
仪器相关制品

PCR仪器支持中心 Q-PCR仪 E-PCR仪电泳仪器产品
Clontech相关组分信息表

Clontech相关组分信息表

技术服务信息

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快速、高灵敏度的qPCR新冠病毒检测解决方案

2020年，新冠肺炎疫情在全球快速蔓延，准确地对新冠病毒进行检出至关重要。通过qPCR方法进行核酸检测，是判断是否携带病毒、是否具有传染性的“金标准”。
Takara作为众多检测试剂盒生产厂商的长期合作伙伴，能够提供【探针/引物合成 +核酸提取 + qPCR试剂 + 防污染措施】在内的完整的qPCR检测解决方案。
尤其是Takara探针法One Step RT-qPCR家族，以第三方认可的高灵敏度、小于20分钟的快速qPCR反应、无需RNA提取的直接qPCR技术，获得了全球科研人员的青睐。

Takara探针法One Step RT-qPCR家族，
检测灵敏度和速度

20分钟检测成为可能——方便的预混型试剂One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG)（Code No. RR600/601）

· 预混型试剂，仅需添加引物、探针、模板，操作简单，降低污染风险。
· 使用新型的 PrimeScript III 反转录酶，高特异性、高延伸性、高耐热性（55℃）。
· 20分钟检测，甚至更快

√ 2020年11月，英国科学家在《Nature》旗下《Scientific Reports》期刊发表文章《CoV2-ID, a MIQE-compliant sub-20-min 5-plex RT-PCR assay targeting SARS-CoV-2 for the diagnosis of COVID-19》，文中使用了RR600进行了快速protocol的优化，【1分钟反转录+1秒变性+1秒退火/延伸】的反应设置，整体反应时间控制在20分钟以内，并在多种仪器上都显示了良好的结果，并有潜力实现更短时间的检测。

· 第三方评测的高灵敏度
2020年4月17日，英国科学家在bioRxiv预印本平台发表文献《Comparison of SARS-CoV2 N gene real-time RT-PCR targets and commercially available mastermixes》。作者比较了四种主流的RT-qPCR试剂对于新冠病毒的检测能力，结果显示：在最低检出界限方面，Takara One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix（Code No. RR600）表现最为出色。

文献详细解读请参考新闻：第三方评测：新冠病毒检测，Takara qPCR试剂表现出色

经典产品，被大量检测机构选择——One Step PrimeScript™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time)（Code No. RR064A）

· 反转录、qPCR在同一管中连续进行的一步（One Step）法试剂，操作简单，并能有效防止污染。
· 疫情初期，中国疾病预防控制中心等权威机构发布了鉴定新型冠状病毒的文献《A Novel Coronavirus from Patients with Pneumonia in China, 2019》，文章中使用了该产品进行新冠病毒的qPCR检测。
· Takara实验例，同其他公司制品相比，可在短时间内完成qPCR分析，RR064可在41分钟内完成解析。
· 经客户优化反应体系和反应条件，新冠病毒qPCR检测可在30分钟内完成。

无需RNA纯化，先进的直接qPCR技术——PrimeDirect^® Probe RT-qPCR Mix (or with UNG)（Code No.RR650/651）

· 无需RNA提取，血液、尿液等样品可直接加入到反应液中进行qPCR检测。
· 在新冠肺炎疫情下，无需RNA提取即可进行新冠病毒核酸检测，可以大大缓解人力、时间等压力。
· 2020年8月，德国科学家在《Journal of Clinical Virology》发表了题为《Extraction-free SARS-CoV-2 detection by rapid RT-qPCR universal for all primary respiratory materials》的文献，文章中作者以PrimeDirect Probe RT-qPCR Mix（Code No.RR650）为基础，研发了无需RNA提取、直接进行新冠病毒qPCR检测的方法。

· 杜塞尔多夫医院目前正在使用这种检测方法，在与感染患者接触的医生和工作人员中频繁地筛查COVID-19，这对于防止感染的局部传播至关重要。

·文献详细解读请参考新闻：无需RNA纯化，生物样本直接qPCR—新冠病毒检测

疫情初期，Takara除了快速反应为广大检测机构和公司提供了大量检测原料外， Takara还研讨了使用上述产品对新冠病毒进行检测的结果，验证了检测灵敏度、扩增情况、多重PCR的实验条件等内容。检测结果请参考新闻：

Takara有担当：提供完善的新冠病毒检测体系和研讨数据

新冠疫情爆发以来，已经有上千篇新冠病毒研究的文献中使用了Takara产品，其中，有50余篇发表在影响因子大于30的高水平期刊上。涉及到定量PCR、核酸提取、引物探针、序列调取、病毒滴度测定、表达系统等多个产品线。其中，使用Takara qPCR产品的文献数量约占1/3。相关信息请参考新闻：

万篇文献供参考，Takara是您值得信赖的科研伙伴

Takara为您提供新冠病毒检测完整解决方案

产品	Code No.	包装量	用途
DNA-OFF^®	9036	500 ml	去除实验区域DNA污染
RNase-OFF^®	9037	500 ml	去除RNase污染
TaKaRa MiniBEST Viral RNA/DNA Extraction Kit Ver.5.0	9766	50 次	柱式法病毒核酸提取
RNAiso Plus	9108/9109	100/200 ml	试剂型Total RNA提取
One Step PrimeScript^™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time)	RR064A/B	100/500 次（50 μl反应）	probe法One Step RT-qPCR
PrimeDirect^® Probe RT-qPCR Mix	RR650A/B	200/1,000 次（25 μl反应）	无需RNA纯化，直接进行probe法One Step RT-qPCR
PrimeDirect^® Probe RT-qPCR Mix, with UNG	RR651A/B	200/1,000 次（25 μl反应）	RR650的UNG版本，防止假阳性
One Step PrimeScript^™ III RT-qPCR Mix	RR600A/B	200/1,000 次（25 μl反应）	完全premix型probe法One Step RT-qPCR
One Step PrimeScript^™ III RT-qPCR Mix, with UNG	RR601A/B	200/1,000 次（25 μl反应）	RR600的UNG版本，防止假阳性
Uracil DNA Glycosylase (UNG), heat-labile	2820	200 U	防止Carryover污染导致的假阳性
dU plus dNTP Mixture (12.5×)	4035	800 μl	防止Carryover污染导致的假阳性
dNTP Mixture	4030	各3.2 μmol/1.28 ml	PCR底物
dNTP Mixture	4019	各2.5 μmol/250 μl	PCR底物
Reverse Transcriptase M-MLV (RNase H-)	2641A/B	10,000/40,000 U	反转录酶
Recombinant RNase Inhibitor	2313A/B	5,000/25,000 U	RNase抑制剂
T7 RNA Polymerase	2540A/B	5,000 U/25,000 U	RNA标准品的体外转录
RNase-free Water	9012	1 ml×10 支	RNA实验用水

除上述目录产品外，Takara不断完善病毒检测方案，提供WHO、中国疾病预防控制中心公布指导的引物探针套装、美国疾病控制与预防中心公布指导的引物探针套装。
同时，引物探针套装中还增加了所有检测靶点Control RNA产品。

一、新型冠状病毒（2019-nCoV）ORF1ab基因、E蛋白基因、N蛋白基因检测套装：

序号	Primer/Probe名称*	碱基序列 (方向为5' to 3')*	5'修饰	3'修饰	Control RNA**
01	2019-nCoV RdRP_SARSr-F2	GTG ARA TGG TCA TGT GTG GCG G			Ger-RdRP
02	2019-nCoV RdRP_SARSr-R1	CAR ATG TTA AAS ACA CTA TTA GCA TA
03	2019-nCoV RdRP_SARSr-P2	CAG GTG GAA CCT CAT CAG GAG ATG C	FAM	BHQ-1
04	2019-nCoV RdRP_SARSr-P1	CCA GGT GGW ACR TCA TCM GGT GAT GC	FAM	BHQ-1
05	2019-nCoV E_Sardeco-F1	ACA GGT ACG TTA ATA GTT AAT AGC GT			Ger-E
06	2019-nCoV E_Sardeco-R2	ATA TTG CAG CAG TAC GCA CAC A
07	2019-nCoV E_Sardeco-P1	ACA CTA GCC ATC CTT ACT GCG CTT CG	FAM	BHQ-1
08	2019-nCoV N_Sarbeco_F1	CAC ATT GGC ACC CGC AAT C			Ger-N
09	2019-nCoV N_Sarbeco_R1	GAG GAA CGA GAA GAG GCT TG
10	2019-nCoV N_Sarbeco_P1	ACT TCC TCA AGG AAC AAC ATT GCC A	FAM	BHQ-1

二、新型冠状病毒（2019-nCoV）ORF1ab/N基因检测套装：

序号	Primer/Probe名称*	碱基序列 (方向为5' to 3')*	5'修饰	3'修饰	Control RNA**
11	2019-nCoV nsp14F	TGG GGY TTT ACR GGT AAC CT			HK-ab1
12	2019-nCoV nsp14R	AAC RCG CTT AAC AAA GCA CTC
13	2019-nCoV nsp14P	TAG TTG TGA TGC WAT CAT GAC TAG	FAM	TAMRA
14	2019-nCoV NF	TAA TCA GAC AAG GAA CTG ATT A			HK-N
15	2019-nCoV NR	CGA AGG TGT GAC TTC CAT G
16	2019-nCoV NP	GCA AAT TGT GCA ATT TGC GG	FAM	TAMRA

根据中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所公布指导，Takara提供一个qPCR引物探针套装：

序号	Primer/Probe名称*	碱基序列 (方向为5' to 3')*	5'修饰	3'修饰	Control RNA**
17	CDC 2019-nCoV ORF1ab-F	CCCTGTGGGTTTTACACTTAA			CDC-ORF1ab
18	CDC 2019-nCoV ORF1ab-R	ACGATTGTGCATCAGCTGA
19	CDC 2019-nCoV ORF1ab-P	CCGTCTGCGGTATGTGGAAAGGTTATGG	FAM	BHQ-1
20	CDC 2019-nCoV N-F	GGGGAACTTCTCCTGCTAGAAT			CDC-N
21	CDC 2019-nCoV N-R	CAGACATTTTGCTCTCAAGCTG
22	CDC 2019-nCoV N-P	TTGCTGCTGCTTGACAGATT	FAM	TAMRA

根据美国疾病控制与预防中心公布指导，Takara提供一个qPCR引物探针套装：

序号	Primer/Probe名称*	碱基序列 (方向为5' to 3')*	5'修饰	3'修饰	Control RNA**
23	US CDC 2019-nCoV_N1-F	GACCCCAAAATCAGCGAAAT			US-N1
24	US CDC 2019-nCoV_N1-R	TCTGGTTACTGCCAGTTGAATCTG
25	US CDC 2019-nCoV_N1-P	ACCCCGCATTACGTTTGGTGGACC	FAM	BHQ-1
26	US CDC 2019-nCoV_N2-F	TTACAAACATTGGCCGCAAA			US-N2
27	US CDC 2019-nCoV_N2-R	GCGCGACATTCCGAAGAA
28	US CDC 2019-nCoV_N2-P	ACAATTTGCCCCCAGCGCTTCAG	FAM	BHQ-1
29	US CDC 2019-nCoV_N3-F	GGGAGCCTTGAATACACCAAAA			US-N3
30	US CDC 2019-nCoV_N3-R	TGTAGCACGATTGCAGCATTG
31	US CDC 2019-nCoV_N3-P	AYCACATTGGCACCCGCAATCCTG	FAM	BHQ-1
32	US CDC RP-F（内参检测用）	AGATTTGGACCTGCGAGCG
33	US CDC RP-R（内参检测用）	GAGCGGCTGTCTCCACAAGT
34	US CDC RP-P（内参检测用）	TTCTGACCTGAAGGCTCTGCGCG	FAM	BHQ-1

*所有引物探针为HPLC纯化级别，客户可以根据需要选择合适的套装。

**Control RNA产品需单独订购，订购时请咨询各地代理商。

Takara还可以提供使用简便、性价比高、可靠的Real Time PCR仪Thermal Cycler Dice Real Time System III (Code No. TP950)。除具有以往Takara PCR仪受到好评的友好操作软件外，还搭载触摸屏控制面板，可进行单机 (独立) 操作，以追求操作简便性。

特点介绍：

◇ 搭载触摸屏，可独立操作，支持英语/日语界面，仪器软件更加追求操作简便性。
◇ 可做高速定量PCR反应。
使用嵌合荧光染料检测法时，与试剂TB Green Fast qPCR Mix（Code No. RR430）搭配使用，TP950可完成快速定量PCR反应。
◇ 专为科研用户设计的便于操作的定量软件。

页面更新：2023-01-19 10:48:14