Takara有担当：提供完善的新冠病毒检测体系和研讨数据

机构用户解决方案

产品选择指南

一般PCR相关制品

PCR Enzyme的选择 PCR原理说明 Takara优选酶多功能酶高保真酶：PrimeSTAR系列基本PCR：Taq系列 Powerful PCR：MightyAmp系列直接电泳的酶制品特殊用途：多重PCR，防污染等高端PCR酶（Clontech） DNA PCR相关制品 RNA PCR相关制品 PCR Subtraction相关制品 PCR仪器
等温扩增相关制品

等温扩增酶
定量PCR相关制品

qPCR学习中心 qPCR套装反转录反应（qPCR专用）反转录反应试剂(Clontech) 嵌合荧光法检测(Takara) 嵌合荧光法检测(Clontech) miRNA 嵌合荧光法检测探针检测 Cycleave探针检测 qPCR－仪器 qPCR Primer qPCR－RNA/DNA的制备
cDNA合成 & 克隆

克隆学习中心 DNA Ligation TA克隆和平滑末端克隆 In-Fusion无缝克隆 cDNA合成&文库构建 SMART全长cDNA合成&文库构建 Random Mutagenesis Site-Directed Mutagenesis 基因组DNA序列调取试剂盒 Vector（克隆用）感受态细胞修饰酶/Ligases 修饰酶/磷酸酶、激酶修饰酶/DNA & RNA Polymerase 修饰酶/焦磷酸酶修饰酶/RTase、RNase Inhibitor 修饰酶/核酸酶、拓扑异构酶 Nucleotide Buffer（Powder）etc. 用于mRNA生产的酶（HQ级） Others（基因工程相关制品）
NGS相关制品

NGS 学习中心单细胞 RNA-Seq 单细胞 DNA-Seq RNA-Seq DNA-Seq 生殖健康表观遗传学分析免疫库分析单细胞分选系统 NGS关联制品 PCR酶（NGS用）前代RNA-Seq/DNA-Seq制品
自动化系统

自动化学习中心高通量单细胞分选系统ICELL8 cx 及其应用高通量Real-Time PCR系统自动化NGS文库制备系统高通量单细胞分选系统ICELL8应用
核酸提取、纯化及DNA标记

DNA片段、质粒DNA纯化基因组DNA纯化试剂(柱式法) 基因组DNA纯化试剂(试剂型) RNA提取、纯化试剂(柱式法) RNA提取、纯化试剂(试剂型) RNA保存试剂 Small RNA提取试剂体液样品exosome提取试剂病毒核酸纯化试剂盒酵母核酸纯化试剂盒核酸提取及纯化制品-Others DNA标记标记DNA-蛋白质的回收
限制酶

限制酶基本信息常规限制酶系列产品 QuickCut限制酶 RNA限制酶
电泳相关制品

核酸染料 DNA Markers RNA Markers 蛋白质Markers Agarose Loading Buffer 常用缓冲液方便装电泳相关装置
蛋白质互作研究（酵母杂交系统）

Takara酵母杂交学习中心 Matchmaker^® Gold酵母双杂系统 Matchmaker^® Gold酵母单杂系统互作的确认和评价 Matchmaker相关制品
表达调节及蛋白质性能分析

iDimerize^™蛋白质互作诱导系统 ProteoTuner^™蛋白质调节系统 Tet诱导表达系统
蛋白质表达相关制品

E.coli蛋白质表达 Brevibacillus/Bacillus蛋白质表达哺乳动物细胞蛋白质表达昆虫细胞蛋白质合成(Clontech) 无细胞蛋白质合成系统 Protein Refolding
蛋白质纯化、分析和检测

Capturem新型膜技术应用蛋白质样品制备 His标签融合蛋白质纯化 GST标签融合蛋白质纯化生物素标签融合蛋白质纯化 DYKDDDDK标签融合蛋白质纯化 Myc标签融合蛋白质纯化抗体纯化蛋白质IP&Co-IP 糖/磷酸化蛋白质纯化蛋白质检测蛋白质电泳胶染色蛋白质定量蛋白酶（His标签去除）蛋白酶（氨基酸序列分析）
基因导入（Virus、Vectors）

病毒基因传递系统选择向导重组慢病毒(Lentivirus)制品重组逆转录病毒(Retrovirus)制品重组腺相关病毒(AAV)制品重组腺病毒(Adenovirus)制品哺乳动物细胞用载体酵母、丝状真菌用载体植物用载体
转染试剂

Xfect转染试剂选择向导质粒转染试剂 RNA转染试剂 Protein转染试剂
干细胞研究相关制品

干细胞学习中心干细胞基因操作 (Cell reprogramming) 细胞 (Cell) 细胞培养产品 (Cell culture) 抗体 (Antibodies) 分化试剂盒和多能性监测 (Pluripotency and Differentiation ) 基因编辑（Gene Editing）
表观遗传学相关制品

甲基化DNA富集相关制品 PCR/qPCR相关制品 Control Genome DNA 甲基化DNA相关酶制品亚硫酸氢盐处理相关制品
基因组编辑相关制品

CRISPR/Cas9 Cre重组酶基因敲入用长单链DNA制备
荧光蛋白质 & 报告系统

荧光蛋白质按颜色、名称分类荧光蛋白质按用途分类荧光蛋白质相关制品报告系统
抗体 & ELISA & 细胞信号转导

细胞增殖、细胞毒性测定细胞凋亡（Takara）细胞凋亡（Clontech） EIA试剂盒（Takara）免疫染色关联制品细胞信号转导（Clontech）酶活性测定试剂盒脂肪细胞、骨细胞分化试剂抗体（Takara）
细胞 & 培养相关制品

细胞培养相关制品细胞生物学检测试剂细胞解冻仪器
microRNA & RNAi研究相关制品

RNA合成提取及纯化制品 microRNA定量PCR miRNA表达 Small RNA克隆 shRNA表达检测合成siRNA定量 RNAi相关制品
Library & cDNA & RNA

Human cDNA libraries series Mouse cDNA libraries series Rat cDNA libraries series cDNA、Genome DNA Total RNA & Poly A⁺ RNA
糖工学相关制品

糖工学酶糖工学试剂盒 Glycosphingolipid解析试剂
应用检测（食品-环境-人）

活菌DNA检测相关制品防污染相关制品食物中毒检测（PCR）食物中毒检测 (Real Time PCR) 食物中毒检测 (按Target选择) 肉种鉴定相关制品水质检测人感染症检测菌种鉴定支原体检测
仪器相关制品

PCR仪器支持中心 Q-PCR仪 E-PCR仪电泳仪器产品
Clontech相关组分信息表

Clontech相关组分信息表

技术服务信息

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Takara有担当：提供完善的新冠病毒检测体系和研讨数据

一、WHO公布的新冠病毒检测RT-qPCR Protocol

面对新冠病毒这个强大的敌人，全球生命科学研究人员在第一时间应对，给出了针对新冠病毒核酸不同位点的不同检测方案。

新冠病毒基因组扩增子的相对位置

上表内容翻译自WHO网站https://www.who.int/emergencies/diseases/novel-coronavirus-2019/technical-guidance/laboratory-guidance

二、Takara探针法One Step RT-qPCR家族

Takara作为众多检测试剂盒生产厂商的长期合作伙伴，在春节期间全力以赴，迅速研发合成每种Protocol对应的检测引物、探针和标准品。中国疾病预防控制中心发表的文献中使用了荧光定量PCR试剂One Step PrimeScript^™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time)（Code No. RR064），也因其高灵敏度、高扩增效率和高扩增特异性的特点，一直备受青睐。

在2019年Takara新推出的性能更优、操作更简便的探针检测一步法RT-qPCR试剂One Step PrimeScript^™ III RT-qPCR Mix（Code No. RR600A）和PrimeDirect^™ Probe RT-qPCR Mix（Code No. RR650A）也受到广泛关注。

产品	Code No.	特点
One Step PrimeScript^™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time)	RR064A/B	probe法One Step RT-qPCR
One Step PrimeScript^™ III RT-qPCR Mix	RR600A/B	完全premix型probe法One Step RT-qPCR
One Step PrimeScript^™ III RT-qPCR Mix, with UNG	RR601A/B	RR600的UNG版本，防止假阳性
PrimeDirect^™ Probe RT-qPCR Mix	RR650A/B	无需RNA纯化，直接进行probe法One Step RT-qPCR
PrimeDirect^™ Probe RT-qPCR Mix, with UNG	RR651A/B	RR650的UNG版本，防止假阳性

三、使用Takara产品进行新冠病毒检测的研讨结果

为了更好地服务科研人员，Takara研讨了使用上述产品按照美国 CDC Protocol对新冠病毒进行检测的结果，验证了检测灵敏度、扩增情况、多重PCR的实验条件等内容。

1. 下面是美国CDC检测Protocol中的引物、探针和Control RNA序列

Oligo name	sequence (5' - 3')	5'	3'	base	Working Conc.	Tm(℃)
2019-nCoV_N1-F	GACCCCAAAATCAGCGAAAT			20	1.5 μM	61.2
2019-nCoV_N1-R	TCTGGTTACTGCCAGTTGAATCTG			24	1.5 μM	62.7
2019-nCoV_N1-P	ACCCCGCATTACGTTTGGTGGACC	FAM	BHQ1	24	0.375 μM	72.2
2019-nCoV_N2-F	TTACAAACATTGGCCGCAAA			20	1.5 μM	62.3
2019-nCoV_N2-R	GCGCGACATTCCGAAGAA			18	1.5 μM	63.4
2019-nCoV_N2-P	ACAATTTGCCCCCAGCGCTTCAG	FAM	BHQ1	23	0.375 μM	72
2019-nCoV_N3-F	GGGAGCCTTGAATACACCAAAA			22	1.5 μM	62.4
2019-nCoV_N3-R	TGTAGCACGATTGCAGCATTG			21	1.5 μM	63.2
2019-nCoV_N3-P	AYCACATTGGCACCCGCAATCCTG	FAM	BHQ1	24	0.375 μM	73.6
RP-F	AGATTTGGACCTGCGAGCG			19	1.5 μM	63.8
RP-R	GAGCGGCTGTCTCCACAAGT			20	1.5 μM	62.9
RP-P	TTCTGACCTGAAGGCTCTGCGCG	FAM	BHQ1	23	0.375 μM	72

	Oligo name	sequence (5' - 3')	base
Control RNA	US-N1	AUGGACCCCAAAAUCAGCGAAAUGCACCCCGCAUUACGUUUGGUGGACCCUCA GAUUCAACUGGCAGUAACCAGAAUG	156
	US-N2	UGAUUACAAACAUUGGCCGCAAAUUGCACAAUUUGCCCCCAGCGCUUCAGCGU UCUUCGGAAUGUCGCGCAUU	146
	US-N3	UGAGGGAGCCUUGAAUACACCAAAAGAUCACAUUGGCACCCGCAAUCCTGCUAA CAAUGCUGCAAUCGUGCUACAACU	155

2. 下面是按照美国CDC检测Protocol扩增的结果

目的基因：N1 模板：Control RNA US-N1 5/50/500/5,000/50,000 copies

目的基因：N2 模板：Control RNA US-N2 5/50/500/5,000/50,000 copies

目的基因：N3 模板：Control RNA US-N3 5/50/500/5,000/50,000 copies

目的基因：RP(RNAse P)基因模板：HL60 RNA 10 pg/100 pg/1 ng/10 ng/100 ng

结论：
N1/N2/N3基因：50个拷贝能够被稳定检出，5个拷贝不能够被稳定检出。
内对照RP基因在10 pg HL60 RNA中能够被检出。

3. 多重定量PCR的研讨结果

使用PrimeDirect^™ Probe RT-qPCR Mix, with UNG（Code No.RR651）对N1基因+RP基因、N3基因+RP基因进行多重定量PCR检测。

1) 多重定量PCR的研讨结果：

2) 扩增曲线如下：

US-N3基因扩增曲线更光滑，荧光信号更高，灵敏度为1～10拷贝。
RP+N3多重PCR结果稳定。

除了上述结果外，为了检测Takara产品对不同仪器的兼容性，我们还研讨了上述多重定量PCR在Takara、Thermo Fisher Scientific、Bio-Rad的定量PCR仪器上的扩增结果，RP+N3多重PCR无相互干扰，三种qPCR仪器均运行稳定，10 copies模板时Ct值≤38。

Takara还将陆续推出更多新冠病毒检测的结果，包括使用PrimeDirect^™ Probe RT-qPCR Mix, with UNG（Code No.RR651）不提取RNA而直接进行定量PCR的研讨，敬请关注。

使用Takara探针检测One Step RT-qPCR Kits，按照日本国立传染病研究所在WHO发布的新冠病毒检测Protocol的详细实验条件和实验优化结果，请参考链接：
https://www.takara-bio.co.jp/goods/info/info144.htm

Takara愿与科研人员一起，用我们的专业专注，筑起对抗疫情的坚强防线。

页面更新：2020-03-18 09:21:31