分泌型蛋白质表达系统B. subtilis Secretory Protein Expression System

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一般PCR相关制品

PCR Enzyme的选择 PCR原理说明 Takara优选酶多功能酶高保真酶：PrimeSTAR系列基本PCR：Taq系列 Powerful PCR：MightyAmp系列直接电泳的酶制品特殊用途：多重PCR，防污染等高端PCR酶（Clontech） DNA PCR相关制品 RNA PCR相关制品 PCR Subtraction相关制品 PCR仪器
等温扩增相关制品

等温扩增酶
定量PCR相关制品

qPCR学习中心 qPCR套装反转录反应（qPCR专用）反转录反应试剂(Clontech) 嵌合荧光法检测(Takara) 嵌合荧光法检测(Clontech) miRNA 嵌合荧光法检测探针检测 Cycleave探针检测 qPCR－仪器 qPCR Primer qPCR－RNA/DNA的制备
cDNA合成 & 克隆

克隆学习中心 DNA Ligation TA克隆和平滑末端克隆 In-Fusion无缝克隆 cDNA合成&文库构建 SMART全长cDNA合成&文库构建 Random Mutagenesis Site-Directed Mutagenesis 基因组DNA序列调取试剂盒 Vector（克隆用）感受态细胞修饰酶/Ligases 修饰酶/磷酸酶、激酶修饰酶/DNA & RNA Polymerase 修饰酶/焦磷酸酶修饰酶/RTase、RNase Inhibitor 修饰酶/核酸酶、拓扑异构酶 Nucleotide Buffer（Powder）etc. 用于mRNA生产的酶（HQ级） Others（基因工程相关制品）
NGS相关制品

NGS 学习中心单细胞 RNA-Seq 单细胞 DNA-Seq RNA-Seq DNA-Seq 生殖健康表观遗传学分析免疫库分析单细胞分选系统 NGS关联制品 PCR酶（NGS用）前代RNA-Seq/DNA-Seq制品
自动化系统

自动化学习中心高通量单细胞分选系统ICELL8 cx 及其应用高通量Real-Time PCR系统自动化NGS文库制备系统高通量单细胞分选系统ICELL8应用
核酸提取、纯化及DNA标记

DNA片段、质粒DNA纯化基因组DNA纯化试剂(柱式法) 基因组DNA纯化试剂(试剂型) RNA提取、纯化试剂(柱式法) RNA提取、纯化试剂(试剂型) RNA保存试剂 Small RNA提取试剂体液样品exosome提取试剂病毒核酸纯化试剂盒酵母核酸纯化试剂盒核酸提取及纯化制品-Others DNA标记标记DNA-蛋白质的回收
限制酶

限制酶基本信息常规限制酶系列产品 QuickCut限制酶 RNA限制酶
电泳相关制品

核酸染料 DNA Markers RNA Markers 蛋白质Markers Agarose Loading Buffer 常用缓冲液方便装电泳相关装置
蛋白质互作研究（酵母杂交系统）

Takara酵母杂交学习中心 Matchmaker^® Gold酵母双杂系统 Matchmaker^® Gold酵母单杂系统互作的确认和评价 Matchmaker相关制品
表达调节及蛋白质性能分析

iDimerize^™蛋白质互作诱导系统 ProteoTuner^™蛋白质调节系统 Tet诱导表达系统
蛋白质表达相关制品

E.coli蛋白质表达 Brevibacillus/Bacillus蛋白质表达哺乳动物细胞蛋白质表达昆虫细胞蛋白质合成(Clontech) 无细胞蛋白质合成系统 Protein Refolding
蛋白质纯化、分析和检测

Capturem新型膜技术应用蛋白质样品制备 His标签融合蛋白质纯化 GST标签融合蛋白质纯化生物素标签融合蛋白质纯化 DYKDDDDK标签融合蛋白质纯化 Myc标签融合蛋白质纯化抗体纯化蛋白质IP&Co-IP 糖/磷酸化蛋白质纯化蛋白质检测蛋白质电泳胶染色蛋白质定量蛋白酶（His标签去除）蛋白酶（氨基酸序列分析）
基因导入（Virus、Vectors）

病毒基因传递系统选择向导重组慢病毒(Lentivirus)制品重组逆转录病毒(Retrovirus)制品重组腺相关病毒(AAV)制品重组腺病毒(Adenovirus)制品哺乳动物细胞用载体酵母、丝状真菌用载体植物用载体
转染试剂

Xfect转染试剂选择向导质粒转染试剂 RNA转染试剂 Protein转染试剂
干细胞研究相关制品

干细胞学习中心干细胞基因操作 (Cell reprogramming) 细胞 (Cell) 细胞培养产品 (Cell culture) 抗体 (Antibodies) 分化试剂盒和多能性监测 (Pluripotency and Differentiation ) 基因编辑（Gene Editing）
表观遗传学相关制品

甲基化DNA富集相关制品 PCR/qPCR相关制品 Control Genome DNA 甲基化DNA相关酶制品亚硫酸氢盐处理相关制品
基因组编辑相关制品

CRISPR/Cas9 Cre重组酶基因敲入用长单链DNA制备
荧光蛋白质 & 报告系统

荧光蛋白质按颜色、名称分类荧光蛋白质按用途分类荧光蛋白质相关制品报告系统
抗体 & ELISA & 细胞信号转导

细胞增殖、细胞毒性测定细胞凋亡（Takara）细胞凋亡（Clontech） EIA试剂盒（Takara）免疫染色关联制品细胞信号转导（Clontech）酶活性测定试剂盒脂肪细胞、骨细胞分化试剂抗体（Takara）
细胞 & 培养相关制品

细胞培养相关制品细胞生物学检测试剂细胞解冻仪器
microRNA & RNAi研究相关制品

RNA合成提取及纯化制品 microRNA定量PCR miRNA表达 Small RNA克隆 shRNA表达检测合成siRNA定量 RNAi相关制品
Library & cDNA & RNA

Human cDNA libraries series Mouse cDNA libraries series Rat cDNA libraries series cDNA、Genome DNA Total RNA & Poly A⁺ RNA
糖工学相关制品

糖工学酶糖工学试剂盒 Glycosphingolipid解析试剂
应用检测（食品-环境-人）

活菌DNA检测相关制品防污染相关制品食物中毒检测（PCR）食物中毒检测 (Real Time PCR) 食物中毒检测 (按Target选择) 肉种鉴定相关制品水质检测人感染症检测菌种鉴定支原体检测
仪器相关制品

PCR仪器支持中心 Q-PCR仪 E-PCR仪电泳仪器产品
Clontech相关组分信息表

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技术服务信息

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分泌型蛋白质表达系统B. subtilis Secretory Protein Expression System
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	3380	B. subtilis Secretory Protein Expression System	10 Rxns	￥5,157

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■ 制品内容 (文库制作10次量)
SP DNA mixture (0.032 pmol/μl)^＊1	45 μl
pBE-S DNA (0.5 μg/μl)^＊2	20 μg
B. subtilis RIK1285 (glycerol stock)^＊3	100 μl x 2

1：与In-Fusion^®克隆系统搭配使用，可编码来源于B. subtilis* 的173种分泌信号肽的DNA混合物。 2：溶于TE buffer(pH8.0)。 3：Marburg 168 derivative : trpC2, lys1, aprEΔ3, nprR2, nprE18

【注意】本制品仅限用于科研目的，凡用于商业用途，须获得Takara公司授权许可。了解详细信息以及获取相关许可文件，请致电4006518761或邮件联络service@takarabiomed.com.cn。

■ 制品说明

使用Bacillus subtilis 作为宿主菌有利于重组蛋白质的可溶性和分泌性表达，尤其适用于含二硫键等复杂结构的蛋白质表达。与大肠杆菌表达系统相比，B. subtilis 表达的重组蛋白质不含内毒素。
T. Eggert等人的研究表明，重组蛋白的分泌水平受信号肽种类的影响十分显著。Takara Bio公司现已开发出一种使用B. subtilis 筛选分泌蛋白有效表达的系统。该系统能够从包含173种B. subtilis 来源的分泌信号肽的文库中，鉴定出适合靶蛋白分泌表达的信号肽。但是，由于B. subtilis 的质粒拷贝数非常低，因此很难在B. subtilis 中构建质粒。本系统使用pBE-S DNA作为E. coli 和B. subtilis 之间的穿梭质粒，从而可以在E. coli 中构建和传递表达质粒。
本系统包括：
SP DNA mixture——B. subtilis 分泌信号肽的DNA文库
B. subtilis / E. coli 穿梭载体pBE-S DNA
B. subtilis strain RIK1285
SP DNA mixture 包含能够编码173种B. subtilis分泌信号肽的DNA片段(用于In-Fusion克隆)。pBE-S DNA载体含有能够在B. subtilis 中发挥作用的pUB110来源的复制起始位点(pUB ori)和一个卡那霉素抗性基因(Kan^r)，以及能在E.coli 中发挥作用的pUC来源的复制起始位点(CoIE ori)和一个氨苄青霉素抗性基因(Amp^r)。此外，在多克隆位点(MCS)和His-Tag序列的上游，还有一段B. subtilis 来源的枯草杆菌蛋白酶启动子(aprE promoter)和分泌信号肽 (aprE SP)序列。含有目的基因的pBE-S DNA载体可使用限制性内切酶Mlu I 和Eco52 I线性化，然后通过Clontech的In-Fusion^®克隆方法，就可以替换aprE SP(参见下方质粒图谱)，引入SP DNA mixture中的173种分泌信号肽的DNA文库，这样就可以为目的蛋白质筛选到合适有效的分泌信号肽。
由于pBE-S DNA载体与E.coli 冷休克表达系统的pCold 载体 (Code No.: 3360～3365 和 3371)的多克隆位点相同，因此目的基因可以很容易地在这些载体之间转移。试剂盒中提供的宿主菌B. subtilis RIK1285有两种蛋白酶缺陷，因此适用于目的蛋白质的分泌表达。

■ 保存

SP DNA mixture和pBE-S DNA : -20℃
B. subtilis RIK1285 (glycerol stock) : -80℃

■ 使用注意

1. 可以选择使用In-Fusion HD Cloning Kit (Code No. 639649/639650)，结合使用Stellar Comptent Cells (Code No. 636763/636766)。
2. SP DNA mixture是由PCR扩增获得的DNA片段，因此，PCR扩增的副产物如引物二聚体等也可能被克隆，但几率较低。

页面更新：2024-02-29 16:17:06

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