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产品选择指南

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TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara RR370A TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase 200 Rxns ¥998
Takara RR370B(A×4) TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase 800 Rxns ¥3,872
Takara RR370S TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase 40 Rxns ¥283
Takara RR371A TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase Dye plus 200 Rxns ¥998
Takara RR371B(A×4) TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase Dye plus 800 Rxns ¥3,872
Takara RR371S TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase Dye plus 40 Rxns ¥283
无标题文档
 
粗提液制备 RNA提取 DNA Markers PCR仪器
 
 
■ 制品内容 (Code No. RR370A/RR371A,50 μl反应体系×200次)
RR370S TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase (2×) 1 ml
RR370A TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase (2×) 1 ml×5
RR371S TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase Dye plus (2×) 1 ml
RR371A TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase Dye plus (2×) 1 ml×5
 
■ 制品说明
TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase是基于Thermococcus属古细菌来源的DNA polymerase新研发的α型PCR酶。
本制品通过优化酶和buffer,提高了对一般PCR试剂难以扩增的GC/AT rich、长链、粗提样品的扩增成功率。并且具有卓越的校对能力,保持了α型DNA聚合酶具有的高保真性,获得的PCR扩增结果特异性高,可用于克隆。
本制品是PCR反应用的DNA Polymerase、Buffer、dNTP Mixture的2倍浓度的混合物。由于在-20℃下保存不会冻结,所以不需要融化,可以直接加入引物和模板进行PCR扩增。
此外,TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase Dye plus(Code No. RR371)版本中,已含有电泳时所必需的色素试剂 (绿色:蓝色和黄色色素),PCR反应后可以直接进行电泳。
本制品是添加了在常温下能够抑制DNA Polymerase活性和3’→5’exonuclease活性的抗体的Hot Start型DNA聚合酶。
另外,因为本制品具有校正活性,扩增的PCR产物大部分都是平滑末端。因此,不能直接进行TA克隆。 如果需要进行克隆,推荐In-Fusion克隆或克隆到平滑末端载体。如果想克隆到T载体上,则需要对3’末端进行dA加尾反应,推荐使用Mighty TA-cloning Reagent Set for PrimeSTAR®(Code No. 6019)。
【补充】
本制品与In-Fusion克隆系统产品组合使用,可以在短时间内高效地将PCR片段克隆到任意载体上。
In-Fusion克隆可以使用In-Fusion Snap Assembly Master Mix(Code No. 638947)等系列产品(参见相关产品页,了解详情)。
 
■ 保存
-20℃。
※注意事项:
使用前请避免剧烈搅拌,轻轻颠倒混匀并离心集液至管底。
 
■ 特 点
· GC/AT rich、长链、粗提样品等难以扩增的模板也能高成功率扩增
· 具有卓越的校对能力,保持了α型DNA聚合酶具有的高保真性
· 2X Premix型试剂,-20℃保存不会冻结,减少操作时间
· 添加色素试剂的版本(绿色),可视性好,可直接进行电泳,操作更简便。
 
■ 用 途
PCR法的DNA扩增
特别推荐用于以下PCR扩增:
· GC-rich、AT-rich等普通酶难以扩增的模板扩增
· 10 kb以上的长链DNA扩增
· 动物组织(如小鼠尾)、植物组织、血液样本等粗提样品起始的扩增
· 核酸含量高的cDNA起始的扩增
· 以克隆为目的的目的基因和载体的扩增
 
■ 以cDNA为模板时,PCR的注意事项
根据cDNA合成反应液成分的不同,作为模板的cDNA加入到PCR反应液中,可能会出现沉淀。
cDNA合成推荐使用PrimeScript™ II 1st strand cDNA Synthesis Kit(Code No. 6210A/B)、PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix(Code No. 6215A/B)
 
■ PCR条件
TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase(2×) 25 μl(final conc. 1×)
Primer 1 10~15 pmol(final conc. 0.2~0.3 μM)
Primer 2 10~15 pmol(final conc. 0.2~0.3 μM)
Template 10 pg ~ 750 ng(参照说明书中「推荐模板添加量」)

灭菌水 Up to 50 μl
 
 
GC/AT rich及10 kb以上的长链扩增,推荐2步法PCR
 
 
注1)避免使用含次黄嘌呤核苷碱基(Inosine)的引物
注2)退火温度根据引物的Tm值来设定
 
*1 在对GC/AT rich和长链目的基因进行扩增时,建议进行94℃1分钟的预变性
*2 在进行粗提样品起始的扩增时,延伸时间推荐设定为1min/kb。
 
TaKaRa Ex Premier DNA
Polymerase/Dye plus
 
 
 

页面更新:2022-07-29 16:14:37