Takara Cas9核酸酶，一款功能强大的基因编辑工具酶！

机构用户解决方案

产品选择指南

一般PCR相关制品

PCR Enzyme的选择 PCR原理说明 Takara优选酶多功能酶高保真酶：PrimeSTAR系列基本PCR：Taq系列 Powerful PCR：MightyAmp系列直接电泳的酶制品特殊用途：多重PCR，防污染等高端PCR酶（Clontech） DNA PCR相关制品 RNA PCR相关制品 PCR Subtraction相关制品 PCR仪器
等温扩增相关制品

等温扩增酶
定量PCR相关制品

qPCR学习中心 qPCR套装反转录反应（qPCR专用）反转录反应试剂(Clontech) 嵌合荧光法检测(Takara) 嵌合荧光法检测(Clontech) miRNA 嵌合荧光法检测探针检测 Cycleave探针检测 qPCR－仪器 qPCR Primer qPCR－RNA/DNA的制备
cDNA合成 & 克隆

克隆学习中心 DNA Ligation TA克隆和平滑末端克隆 In-Fusion无缝克隆 cDNA合成&文库构建 SMART全长cDNA合成&文库构建 Random Mutagenesis Site-Directed Mutagenesis 基因组DNA序列调取试剂盒 Vector（克隆用）感受态细胞修饰酶/Ligases 修饰酶/磷酸酶、激酶修饰酶/DNA & RNA Polymerase 修饰酶/焦磷酸酶修饰酶/RTase、RNase Inhibitor 修饰酶/核酸酶、拓扑异构酶 Nucleotide Buffer（Powder）etc. 用于mRNA生产的酶（HQ级） Others（基因工程相关制品）
NGS相关制品

NGS 学习中心单细胞 RNA-Seq 单细胞 DNA-Seq RNA-Seq DNA-Seq 生殖健康表观遗传学分析免疫库分析单细胞分选系统 NGS关联制品 PCR酶（NGS用）前代RNA-Seq/DNA-Seq制品
自动化系统

自动化学习中心高通量单细胞分选系统ICELL8 cx 及其应用高通量Real-Time PCR系统自动化NGS文库制备系统高通量单细胞分选系统ICELL8应用
核酸提取、纯化及DNA标记

DNA片段、质粒DNA纯化基因组DNA纯化试剂(柱式法) 基因组DNA纯化试剂(试剂型) RNA提取、纯化试剂(柱式法) RNA提取、纯化试剂(试剂型) RNA保存试剂 Small RNA提取试剂体液样品exosome提取试剂病毒核酸纯化试剂盒酵母核酸纯化试剂盒核酸提取及纯化制品-Others DNA标记标记DNA-蛋白质的回收
限制酶

限制酶基本信息常规限制酶系列产品 QuickCut限制酶 RNA限制酶
电泳相关制品

核酸染料 DNA Markers RNA Markers 蛋白质Markers Agarose Loading Buffer 常用缓冲液方便装电泳相关装置
蛋白质互作研究（酵母杂交系统）

Takara酵母杂交学习中心 Matchmaker^® Gold酵母双杂系统 Matchmaker^® Gold酵母单杂系统互作的确认和评价 Matchmaker相关制品
表达调节及蛋白质性能分析

iDimerize^™蛋白质互作诱导系统 ProteoTuner^™蛋白质调节系统 Tet诱导表达系统
蛋白质表达相关制品

E.coli蛋白质表达 Brevibacillus/Bacillus蛋白质表达哺乳动物细胞蛋白质表达昆虫细胞蛋白质合成(Clontech) 无细胞蛋白质合成系统 Protein Refolding
蛋白质纯化、分析和检测

Capturem新型膜技术应用蛋白质样品制备 His标签融合蛋白质纯化 GST标签融合蛋白质纯化生物素标签融合蛋白质纯化 DYKDDDDK标签融合蛋白质纯化 Myc标签融合蛋白质纯化抗体纯化蛋白质IP&Co-IP 糖/磷酸化蛋白质纯化蛋白质检测蛋白质电泳胶染色蛋白质定量蛋白酶（His标签去除）蛋白酶（氨基酸序列分析）
基因导入（Virus、Vectors）

病毒基因传递系统选择向导重组慢病毒(Lentivirus)制品重组逆转录病毒(Retrovirus)制品重组腺相关病毒(AAV)制品重组腺病毒(Adenovirus)制品哺乳动物细胞用载体酵母、丝状真菌用载体植物用载体
转染试剂

Xfect转染试剂选择向导质粒转染试剂 RNA转染试剂 Protein转染试剂
干细胞研究相关制品

干细胞学习中心干细胞基因操作 (Cell reprogramming) 细胞 (Cell) 细胞培养产品 (Cell culture) 抗体 (Antibodies) 分化试剂盒和多能性监测 (Pluripotency and Differentiation ) 基因编辑（Gene Editing）
表观遗传学相关制品

甲基化DNA富集相关制品 PCR/qPCR相关制品 Control Genome DNA 甲基化DNA相关酶制品亚硫酸氢盐处理相关制品
基因组编辑相关制品

CRISPR/Cas9 Cre重组酶基因敲入用长单链DNA制备
荧光蛋白质 & 报告系统

荧光蛋白质按颜色、名称分类荧光蛋白质按用途分类荧光蛋白质相关制品报告系统
抗体 & ELISA & 细胞信号转导

细胞增殖、细胞毒性测定细胞凋亡（Takara）细胞凋亡（Clontech） EIA试剂盒（Takara）免疫染色关联制品细胞信号转导（Clontech）酶活性测定试剂盒脂肪细胞、骨细胞分化试剂抗体（Takara）
细胞 & 培养相关制品

细胞培养相关制品细胞生物学检测试剂细胞解冻仪器
microRNA & RNAi研究相关制品

RNA合成提取及纯化制品 microRNA定量PCR miRNA表达 Small RNA克隆 shRNA表达检测合成siRNA定量 RNAi相关制品
Library & cDNA & RNA

Human cDNA libraries series Mouse cDNA libraries series Rat cDNA libraries series cDNA、Genome DNA Total RNA & Poly A⁺ RNA
糖工学相关制品

糖工学酶糖工学试剂盒 Glycosphingolipid解析试剂
应用检测（食品-环境-人）

活菌DNA检测相关制品防污染相关制品食物中毒检测（PCR）食物中毒检测 (Real Time PCR) 食物中毒检测 (按Target选择) 肉种鉴定相关制品水质检测人感染症检测菌种鉴定支原体检测
仪器相关制品

PCR仪器支持中心 Q-PCR仪 E-PCR仪电泳仪器产品
Clontech相关组分信息表

Clontech相关组分信息表

技术服务信息

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Takara Cas9核酸酶，一款功能强大的基因编辑工具酶！

CRISPR/Cas9基因编辑包括两大组件：“向导”sgRNA和“剪刀”Cas9核酸酶，二者共同作用，结合形成切割复合体，能够靶向地对外源基因进行敲除、插入、定点突变等编辑，使得定点基因组改变的难度明显降低，可进行操作的目标生物种类大大增加。
在基因编辑实验中，如何将sgRNA和Cas9蛋白质导入细胞是十分重要的环节，选择到合适的方法或体系可以大大提高基因编辑的成功率。

目前基因编辑技术较为成熟，针对不同的细胞，更是开发出了多种导入体系，较为成熟完善的传统体系有质粒载体导入、病毒载体导入，比较新颖且有特色的体系有纳米囊泡系统导入以及RNP复合物的直接导入。在实验条件允许的情况下，相对于其他导入方式，RNP复合物的直接导入更加突出了以下几点优势：

1、不使用Cas9基因，从而有效抑制由于基因残留使Cas9持续表达造成的脱靶现象
2、不存在由于蛋白质转录、翻译表达所引起的时间滞后，可实现快速有效的突变导入
3、不需要考虑每个靶向生物的启动子和密码子
4、可以控制导入的Cas9蛋白质的量

而Cas9核酸酶作为RNP复合物重要组成部分，选择并使用一款优质的Cas9核酸酶就变得异常重要。Takara有来源于野生型酿脓链球菌的重组Cas9蛋白质，助力基因编辑，锚定靶点切割！Guide-it Recombinant Cas9蛋白质含量较高，可满足电穿孔、显微注射等多种不同复合物导入方式，C末端的NLS核定位信号可以实现快速有效的突变导入，且经过不断的产品优化已证实对哺乳动物细胞具有良好的耐受性，可降低导入哺乳动物细胞时所造成的细胞损伤，使脱靶效应最小化的同时，更容易实现高效率的基因编辑。

Code No.	产品名称
632640	Guide-it Recombinant Cas9 (3 μg/μl)
632641	Guide-it Recombinant Cas9 (3 μg/μl)
632678	Guide-it Recombinant Cas9 (10 μg/μl)
632679	Guide-it Recombinant Cas9 (10 μg/μl)

更稳定！更高效！

1.不同公司Cas9产品在hiPS细胞中基因敲除效率比较

实验案例：Cellartis hiPSC-18细胞系中的基因敲除

数据来源于Takara Bio USA, Inc.

通过剪切后的条带强度可以对编辑细胞所占的百分比进行半定量估计。凝胶底部的每个数字代表所示RNP的基因编辑效率（以百分比表示）。结果显示，与其他品牌推荐的制备向导RNA的方法相比，Guide-it Recombinant Cas9与Guide-it In Vitro Transcription Kit制备的sgRNA结合使用，可以为许多靶点提供一致且有效的基因编辑。

更广泛！更普适！

2.不同细胞系人诱导多能干细胞（hiPSC）中基因敲除效率比较

实验案例：多系人诱导多能干细胞（hiPSC）CD81基因敲除

在本实验中，将Cas9-sgRNA RNP复合物通过电穿孔方式导入至hiPSC-18 和hiPSC-22两种诱导多能干细胞中敲除CD81基因。CD81抗体染色后，流式细胞术检测结果显示，电穿孔10天后hiPSC-18的敲除效率为91％，hiPSC-22的敲除效率为85％，显示出非常高的基因编辑效率。

更多应用场景！

3.Guide-it Recombinant Cas9用于基因敲入实验

实验案例：AAVS1和CXCR4基因同源定向修复

Panel A. 这些图表展示了CD34+造血干细胞的HDR实验是如何完成的。将含有Hind III酶切位点的ssDNA模板插入AAVS1基因中，将同时含有Hind III和BamH I酶切位点的模板插入CXCR4基因中。每侧同源臂长度为90 bp。
Panel B. 将修复模板和Cas9/sgRNA RNPs通过电穿孔导入后，用PCR扩增靶细胞中各目标基因，并进行酶切分析。编辑效率显示在凝胶上每个阳性孔上面。CXCR4基因经过BamH I酶切后显示出一条额外条带，原因是基因编辑前野生型基因中已经存在一个BamH I位点了。基因编辑5天后，我们证实98%的造血干细胞CD34+染色阳性。

更多生产标准级别！

4.GMP级别Cas9核酸酶效率验证

为了满足更多临床研究试验的需求，Takara提供批次差异更低的产品，面向需要更高产品品质的用户，我们也同时提供Recombinant Cas9 Protein GMP grade，即GMP级别的Cas9核酸酶，制造过程中不使用人源或动物源成分，已通过日本药品与食品安全局（PFSB）的GMP级别标准生产测试，得到生产许可，并在该标准下进行制造和品质管理，适用于体外细胞工程和基因治疗研究。

Code No.	产品名称
T230	Recombinant Cas9 Protein GMP grade

以敲除293T细胞CD81基因为例，对Guide-it Recombinant Cas9（632641）和Recombinant Cas9 Protein GMP grade（T230）进行基因组组编辑性能对比，结果证实T230具有与632641/632640相同的基因组编辑效率。

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sgRNA的体外转录和筛选系统

可以被用来合成和检测sgRNAs效率。该试剂盒包含了体外转录和纯化sgRNAs，以及检测重组Cas9核酸酶对PCR靶向片段剪切效率，可用于CRISPR/Cas9 研究中sgRNA的制备、纯化和评价。

Code No.	产品名称
632636	Guide-it Complete sgRNA Screening System

· 通过体外转录有效制备用于CRISPR/Cas9基因编辑高品质sgRNA的简便试剂盒
· 所制备sgRNA可用于体外剪切活性确认实验和突变导入实验
· sgRNA的产量、简便性及性价比进一步优化提升

Takara Guide-it™产品线长期致力于基因编辑实验的解决方案！更多基因编辑相关资料欢迎您点击下载CRISPR/Cas9基因编辑完整解决方案宣传册，或直接观看在线讲座视频CRISPR/Cas9基因编辑全套操作和解决方案。

页面更新：2022-11-24 10:07:30