T7 RNA Polymerase, HQ (high quality)是一种可用于基础研究的产品,用于制备非临床试验的医药品原药、开发符合GMP指南的医药品制造工艺以及开发RNA药物等。本产品的终反应液中,不含人或动物源性成分以及β内酰胺类化合物。
本酶具有与T7 RNA Polymerase ver.2.0(Code No. 2541A)同等的性能,且能够以含有T7启动子序列的双链DNA为模板,以NTP为基质,通过转录启动子下游区域,在体外合成单链RNA。与附带的反应缓冲液(10X IVT Reaction Buffer, HQ)配合使用时,可大量制备高质量的RNA,适用于RNA医药领域的研发。
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■ HQ级别品质 |
本产品的终反应液中,不含人或动物源性成分以及β内酰胺类化合物。 |
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■ 保存 |
-20℃。 |
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■ 起源 |
Escherichia coli carrying a plasmid containing the gene for phage T7 RNA polymerase |
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■ 性质 |
1. 分子量:约99.8 kDa
2. 辅因子:Mg2+
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■ 活性定义 |
在37℃条件下,1小时内生成0.5μg的1.9kb FLuc RNA所需的酶量定义为1个活性单位(U)。 |
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■ 用途 |
1. 合成RNA,用于酶的带帽结构
2.合成基于Cap analog带帽结构的mRNA
3.长链非编码RNA(Long non-coding RNA)的合成
4.向导RNA(guide RNA)的合成
5.siRNA前体的合成
6.用于RT-qPCR的RNA标准模板的合成
7.高特异性RNA探针的合成
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■ 使用注意 |
1. 请勿剧烈搅拌本酶。
2. 当dsDNA模板、试剂、试管或微量移液器枪头被RNase污染时,合成的RNA产量会降低或者出现片段化。在实验过程中应采取预防措施以避免RNase污染,例如戴一次性手套和使用专门用于RNA实验的试管和微量移液器枪头。
3. 为合成长度均等的RNA,可将含有T7启动子的线性化质粒或PCR产物等作为DNA模板来使用。理想的线性化模板末端应为5’-突出或平端。
4. 高质量10×IVT Reaction Buffer含有亚精胺。亚精胺与核酸形成复合体,在某些情况下可能产生沉淀,因此模板DNA应在加酶之前即倒数第二步再加入反应体系中。
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