| 在模板及引物存在的条件下，催化与模板互补的脱氧核苷酸依次选择性地连接在引物的3′-OH末端上的反应。本酶还具有单链DNA特异性的3′→5′外切核酸酶活性，该活性比Klenow Fragment强100～1,000倍。本酶没有5′→3′的外切核酸酶活性。 |
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| ■ 保存 |
| -20℃。 |
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| ■ 起源 |
| Escherichia coli carrying the plasmid containing phage T4 DNA polymerase gene |
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| ■ 活性定义 |
| 以活性化Poly (dA-dT) DNA为摸板/引物，在37℃、pH8.8条件下，30分钟内使10 nmol的dATP和dTTP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量，定义为1个活性单位 (U)。 |
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| ■ 用途 |
1. 利用较强的3′→5′的外切核酸酶活性，通过置换合成从DNA片段的3’末端进行标记。
2. DNA末端的平滑化。
3. 通过引物延伸法解析mRNA转录的起始点。
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| ■ 使用注意 |
1. 本酶的最适pH为8-9，在pH7.5及pH9.7时活性降低50%。
2. 活性的表达需要Mg2+的存在。为了获得较大活性，还需要SH基的还原剂存在。
3. 整个反应体系中的离子强度超过100 mM时活性将被抑制。
4. 本酶易受模板DNA高级结构的影响，T4 gene 32产物可以显著提高聚合酶活性，而3′→5′的外切核酸酶活性则完全被抑制。
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