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TaKaRa MiniBEST Plasmid Purification Kit Ver.4.0
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 9760 TaKaRa MiniBEST Plasmid Purification Kit Ver.4.0 50 次 ¥381
 
■ 制品内容 (50 次量)
本试剂盒分试剂Set 与Column Set两部分。
□ 试剂Set  
RNase A (10 mg/ml) 140 μl
Solution Ⅰ 14 ml
Solution Ⅱ*1 14 ml
Solution Ⅲ*2 24 ml
Buffer WA*2 28 ml
Buffer WB*3 24 ml
Elution Buffer 2 ml × 2
*1含有强碱溶液,应避免与皮肤、衣物等接触。若不小心接触到眼睛或皮肤时,请立即到医院进行处理。
*2 含有强变性剂,应避免与皮肤、衣物等接触。若不小心接触到眼睛或皮肤时,请立即到医院进行处理。
*3 首次使用前,向Buffer WB中添加56 ml的100%乙醇。
 
□ Column Set  
Spin Columns 50 支
Collection tubes 50 支
 
■ 制品说明
本试剂盒是用于质粒 (Plasmid) DNA小量纯化的试剂盒。试剂盒采用了传统的SDS碱裂解法,结合硅胶膜技术,具有高效、快速、方便之特点,全套操作只需1小时便可完成。使用本试剂盒可从1~4 ml LB培养基过夜培养的菌液中纯化得到1~20 μg的高纯度质粒DNA (OD260/OD280 = 1.8~2.0),制备过程无需苯酚抽提、乙醇沉淀等步骤,所得质粒DNA溶解于Tris Buffer或水中,纯度较高,可直接用于转化、DNA序列分析、体外转录、限制酶切以及其他各种酶促反应。
 
■ 保存与运输
1. 本试剂盒可以在室温下(15-25℃)保存,但温度较低时,有的Buffer会出现沉淀,使用前需37℃加热直至沉淀消失。
2. SolutionⅠ中加入RNase A后可于4℃保存约3个月。
3. RNase A可于室温下 (15-25℃) 保存6个月,长期保存需存放于-20℃。
4. 本试剂盒于室温下 (15-25℃) 运输。
 
■ 实验操作流程图
 
■ 注意事项
1. 每次起始的菌液量应控制在1~4 ml,菌量太大影响溶菌及质粒DNA的释放,纯化时会影响质粒DNA的纯度。菌体的培养时间不要超过16小时,否则难以裂解。
2. 加入Solution Ⅱ和Solution Ⅲ后,不要剧烈混合(Vortex等),剧烈混合会导致基因组DNA的污染。
3. 加入Solution Ⅲ后,应充分混合使蛋白质、基因组DNA等形成白色沉淀,离心后沉降于离心管底部。若离心后沉淀仍悬浮于溶液中时,请将离心管上下翻转混合数次后高速离心3~5分钟。
4. 纯化的质粒DNA用于DNA序列分析时,最好使用灭菌蒸馏水洗脱质粒DNA。
5. 质粒DNA需长期保存时,建议在Elution Buffer中保存。
 
 

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