本制品是采用TB Green嵌合荧光法进行Real Time PCR的专用试剂。制品中含有Real Time PCR反应的最适浓度TB Green和ROX Reference Dye,是一种2X 浓度的Premix Type试剂,进行实验时,PCR反应液的配制十分方便简单。
本制品中还添加了Tli RNaseH (耐热性RNaseH),以cDNA作为模板进行PCR反应时,可以很好抑制由于cDNA中残存mRNA对PCR反应造成的阻害作用。
本制品Buffer经过改良,反应特异性更高,能抑制非特异性反应,可以在宽广的范围内进行更加准确的定量。本Buffer和Hot Start法用DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq® HS组合使用,可以进行重复性好、可信度高的Real Time PCR解析。 |
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■ 保存 |
4℃可保存6个月。
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避光保存,避免污染。 |
长期保存请置于-20℃。产品融解后请于4℃保存,并在6个月内用完。 |
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■ 注意事项 |
1. 使用前,请上下轻轻颠倒混匀,避免产生气泡,防止因混合不均匀造成的反应效果不佳。
(1)
请勿涡旋振荡混匀。
(2) TB Green Premix Ex Taq II (2X) (Tli RNaseH Plus), ROX plus在-20℃存放可能会产生白色或淡黄色的沉淀,可用手握缓慢溶解,于室温 (<30℃) 短时间避光放置,轻柔上下颠倒混匀直至沉淀全部消失。
(3) 沉淀会导致溶液成分不均匀,使用前务必充分混匀试剂。
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2. 配制反应液时,试剂请于冰上放置。
3. 本制品中含有ROX Reference Dye和TB Green,配制PCR反应液时应避免强光照射。
4. 反应液的配制、分装请一定使用新的 (无污染的) 枪头、Microtube等,尽量避免污染。
5. 本制品中使用的TaKaRa Ex Taq HS是利用抗Taq抗体的Hot Start用DNA聚合酶,与其他公司的化学修饰型Hot Start用DNA聚合酶相比,不需要PCR反应前的95℃、5~15分钟的酶的活性化反应。如果高温处理时间过长,会使酶的活性下降,其PCR的扩增效率、定量准确度等都会受到影响。如果在PCR反应前进行模板的预变性,通常设定为95℃、30秒。 |