我们使用cookie改善您的浏览体验并提供有意义的内容。请阅读我们的cookie协议
收藏我们 在线订购 CoA查询
     

机构用户解决方案

产品选择指南

技术服务信息

当前位置:首页 > 新闻中心
无标题文档
高通量单细胞全长转录组分析解决方案!
SMART-Seq Pro & ICELL8 cx平台联合分析
 
全长序列覆盖可以实现对整个转录组的差异表达分析,并且可以对基因融合、剪接体这类生物标志物进行检测。经深度优化推出的SMART-Seq Pro Application Kit(Cat No. 640257),具备良好的单细胞全长mRNA分析能力,在ICELL8 cx单细胞分析平台上的一张微孔芯片内,经过一系列分注和扩增步骤后,获得无偏倚的全长cDNA,并通过Illumina Bead-Linked Transposome(BLT)完成酶切片段化,同时引入Illumina特异性测序接头,可高效完成1,200~1,500个单细胞 (核)文库构建,完整的分析方案同时整合了生物信息学工具,为“藏珠于海”的转录水平稀有生物标志物发掘提供了有力工具。
 
ICELL8 cx Single-Cell System纳升级高通量自动化单细胞分析平台(点击获取产品手册
 
端到端的解决方案:从文库制备到测序数据分析工具
覆盖全长mRNA:捕获转录组中“深藏”的关键生物标志物,如基因融合、剪接异构体
高通量单细胞分析:可以平行地从>1,000个单细胞中生成测序数据
样品配置灵活:一次实验最多可对八种细胞样品进行分析
减少样品操作:减小数据波动,构建测序文库前ICELL8 cx平台自动鉴定并分选出您感兴趣的细胞,仅对这些细胞进行试剂分注
Illumina平台测序文库:制备的测序文库适用于Illumina全系平台
易用的生物信息学分析工具:Cogent NGS Analysis PipelineCogent NGS Discovery Software
 
货号 产品
640257   SMART-Seq® Pro Application Kit - 2 Chips
640019   ICELL8® 350v Chip(芯片)
640188   ICELL8® cx Single-Cell System(仪器
旧版本:SMART-Seq® ICELL8® cx Application Kit 1 Chip(Cat No. 640222)仍可购买
 
√性能展示

我们比较了SMART-Seq Pro与实验室自制方法SMART-seq2(SS2)在对低RNA含量的原代细胞(如PBMC)等不同细胞样本的检测敏感性差异,发现SMART-Seq Pro试剂盒识别并检测到的基因数量明显比SS2多,突出了SS Pro具有揭示罕见生物事件的能力。

 
图A:基于转录本表达的人PBMC细胞簇
图B/C:选择性剪切产生的不同PTPRC亚型:PTPRC-201和PTPRC-209的不同表达水平
图D: 每个细胞簇中PTPRC同种亚型的不同表达水平
 
SMART-Seq Pro除了可以对基因表达谱进行分析外,还具有检测不同PTPRC亚型转录水平的能力。通过SMART-Seq Pro进行全长转录分析,可额外获得3’端分析所遗漏的生物学信息,结合Congent NGS生信分析工具,提供对单细胞样本中重要生物标志物的高灵敏检测方案。
数据来源于Takara Bio USA, Inc.
 

自动化ICELL8 cx系统结合SMART Seq-Pro可以识别X公司系统上丢失的亚型表达数据。
SMART Seq-Pro能够识别跨外显子3、4、5、6和7的Junction reads,并揭示了PTPRC-201和PTPRC-209同种型的不同特征。而X公司末端计数法产生的数据则无法识别这些外显子区域中的junctions reads(峰值代表来自未对准读数的噪声)。

 
详情内容
点击下载
 
√应用案例速享

文献题目:Single cell full-length transcriptome of human subcutaneous adipose tissue reveals unique and heterogeneous cell populations

发表期刊:iScience

发表时间:2022年8月19日

发表机构: AdventHealth translational research institute, Icahn School of Medicine

方案设计:
对两名受测女性进行了皮下腹部脂肪组织活检(STAR方法)取样。每个活检样本的一部分快速冷冻,用于snRNA-Seq的细胞核提取。另一部分用胶原酶缓冲液消化,并通过差速离心分离成脂肪细胞和SVF。从脂肪细胞中提取细胞核进行snRNA-Seq,而SVF中的细胞进行scRNA-Seq。在ICELL8平台(Takara)上使用全长SMART-Seq技术对整个WAT、分离的脂肪细胞和人类SVF中的sc/snRNA-Seq进行了全面分析。

研究结论:
通过整个组织的snRNA-Seq、分离脂肪细胞的snRNA-Seq和SVF的scRNA- Seq来共同验证WAT的转录组成。由于每个细胞的覆盖深度,每组分析都超过了迄今为止在单细胞脂肪组织研究中发现的每个细胞/细胞核的基因数量,同时增强的基因覆盖率允许更准确地描述转录组,并识别脂肪生态位内的细胞类型。
分析结果表明,全WAT的snRNA序列提供了主要覆盖的细胞类型,识别了三个不同的脂肪细胞簇,并能够用拟时分析跟踪脂肪细胞分化。与WAT相比,脂肪细胞snRNA Seq无法匹配脂肪细胞异质性信息。SVF的scRNA-Seq结果提供了更高的非脂肪细胞分辨率。这些分析结果为单细胞全长转录分析在人类WAT和SVF中的应用提供了关键证据。

经验分享:
实验使用全长SMART-Seq技术,在每种类型的分析中实现了从5’端到3’端的强大基因覆盖。当使用从冷冻的人WAT中提取的细胞核时,全长SMART-Seq技术可以很好地分析脂肪生成的转录谱。此外,利用全长SMART-Seq单细胞技术,在使用相对较少的细胞的情况下,可以在人SVF中深入探索非脂肪细胞的多样性。

 
 

页面更新:2023-02-27 16:26:45