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TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase

可与In-Fusion试剂盒组合，简单高效的进行克隆

使用TaKaRa Ex Priemier DNA Polymerase（不添加色素/添加色素）扩增后的PCR产物（平滑末端）和线性化质粒载体，使用In-Fusion Snap Assembly Master Mix进行克隆后，确认目的克隆的获取效率。需要插入的PCR产物末端设计了与线状化质粒载体末端具有15 bp的同源序列。此外，在In-Fusion反应时，使用Cloning Enhance，PCR产物无需再进行单独的纯化流程。

＜In-Fusion克隆流程＞

1）通过EX Premier（无色素版本/有色素版本）扩增各种目的基因

使用TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase对11种目的基因进行扩增，之后通过电泳确认，所有的目的基因都没有检测到非特异性扩增，可以使用Clonning Enhance进行纯化。使用Cloning Enhance，PCR产物无需再进行单独的纯化流程，可以简单且放心地进行In-Fusion反应。

2）EX Premier（无色素版本/有色素版本）扩增的PCR产物的克隆结果

1）中扩增的目的基因，使用了来自PLN和GATA4的PCR产物进行In-Fusion克隆，随机选取了5个大肠杆菌菌落，使用PCR方法，对插入片段进行确认。无论不含色素酶还是含色素酶，全部确认有目的基因插入。