不同反应温度下蛋白质的表达 |
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·向Human Cell-Free Protein Expression Master Mix for mRNA无细胞表达系统中,分别添加3种蛋白质对应的加帽mRNA*。对应表达三种蛋白质:elF4G,FLuc和ZsGreen。(elF4G: 170 kDa, FLuc: 61 kDa, ZsGreen: 26 kDa) ·在27℃、32℃及37℃下孵育3小时。 结果显示,蛋白质表达量最大对应的温度分别为:eIF4G在27℃和32℃,FLuc在27℃,ZsGreen在32℃。这表明,在该无细胞表达系统中,最佳反应温度因蛋白质而异。 |
*:mRNA合成使用的试剂为:Cloning Kit for mRNA Template (BspQ I) (Code No. 6133),Takara IVTpro T7 mRNA Synthesis Kit (Code No. 6144),TriLink公司帽类似物CleanCap Reagent AG (3’OMe) 。 |