Takara

同mRNA添加量下蛋白质的表达

·向Human Cell-Free Protein Expression Master Mix for mRNA无细胞表达系统中，分别添加3种蛋白质对应的加帽mRNA^*和非加帽mRNA，对应表达三种蛋白质：elF4G，FLuc和ZsGreen。（elF4G: 170 kDa, FLuc: 61 kDa, ZsGreen: 26 kDa）
·mRNA加量分别为1 μg、2 μg、4 μg。
·32℃下孵育3小时，进行SDS-PAGE和荧光强度测定。
结果显示，仅在加帽mRNA的表达结果中确认了目标蛋白质的高表达。说明该无细胞表达系统，mRNA的表达是加帽依赖性的。此外，添加2 μg mRNA时表达量最高。

*：mRNA合成使用的试剂为：Cloning Kit for mRNA Template (BspQ I) (Code No. 6133)，Takara IVTpro T7 mRNA Synthesis Kit (Code No. 6144)，TriLink公司帽类似物CleanCap Reagent AG (3’OMe) 。