扩增片段长度

 
(1)人基因组DNA
 
以人基因组DNA为模板,比较在各公司推荐的PCR反应条件下可以扩增的片段长度。
PrimeSTAR® Max DNA Polymerase Ver.2(Code No. R047A)在延伸时间为5 sec/kb或10 sec/kb的快速反应中,可以扩增15 kb的片段,扩增15 kb片段的PCR反应总时长是1 h 42 min。
 
模板:人基因组DNA (100 ng /50 μl反应体系)
 
  1. 0.5 kb 5. 4 kb
  2. 1 kb 6. 7.5 kb
  3. 2 kb 7. 10 kb
  4. 3 kb 8. 15 kb
 
(Takara Bio Inc.比较结果)
 
反应条件:按各公司推荐的PCR反应条件实验
 
PCR仪:使用Clontech PCR Thermal Cycler GP (Code No. WN400)
 
(2)人cDNA
 
以人cDNA为模板,比较在各公司推荐的PCR反应条件下可以扩增的片段长度。
PrimeSTAR® Max DNA Polymerase Ver.2(Code No. R047A)在延伸时间为10 sec/kb的快速反应中,可以扩增6 kb的片段。在延伸时间为20 sec/kb的反应中可以扩增8 kb的片段(12 kb的片段也可以扩增成功),扩增6 kb片段的PCR反应总时长是1h 6 min。
 
模板:人cDNA(相当于Total RNA 250 ng / 50 μl反应体系)
 
  1. 1 kb 4. 6 kb
  2. 2 kb 5. 8 kb
  3. 4 kb 6. 12 kb
 
(Takara Bio Inc.比较结果)
 
反应条件:按各公司推荐的PCR反应条件实验
 
PCR仪:使用Clontech PCR Thermal Cycler GP (Code No. WN400)