灵敏度和模板添加量比较 | ||||||||||||||||
(1)cDNA | ||||||||||||||||
按各公司推荐的PCR反应条件,对10 ng -1 μg total RNA反转录获得的cDNA进行灵敏度和模板添加量的比较。 PrimeSTAR® Max DNA Polymerase Ver.2(Code No. R047A)在延伸时间为5 sec/kb或10 sec/kb的快速反应中,total RNA的扩增效果良好(相当于10 ng-1 μg模板cDNA)。 |
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目的基因:TFR 4 kb(50 μl反应体系) | ||||||||||||||||
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(Takara Bio Inc.比较结果) | ||||||||||||||||
反应条件:按各公司推荐的PCR反应条件实验 PCR仪:使用Clontech PCR Thermal Cycler GP (Code No. WN400) |
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(2)人基因组DNA | ||||||||||||||||
以人基因组DNA(0.1 ng-1 μg)为模板,在各公司推荐的PCR条件下对扩增DCLRE1A基因(4 kb)的灵敏度和模板添加量进行比较。 使用PrimeSTAR® Max DNA Polymerase Ver.2(Code No. R047A),以人基因组DNA(10 ng-600 ng)为模板进行PCR反应。在延伸时间为5 sec/kb的反应中,对10 ng-600 ng的人基因组DNA有良好的扩增结果。另外,在延伸时间为10 sec/kb的反应中,对10 ng-1 μg的人基因组DNA有良好的扩增结果。 |
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目的基因:DCLRE1A 4 kb(50 μl反应体系) | ||||||||||||||||
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(Takara Bio Inc.比较结果) | ||||||||||||||||
反应条件:按各公司推荐的PCR反应条件实验 PCR仪:使用Clontech PCR Thermal Cycler GP (Code No. WN400) |
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