Takara

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■ LAMP使用例

Nuclease-free water	x μl
2X BcaBEST Buffer	12.5 μl
10X LAMP primer mix^*1	2.5 μl
BcaBEST DNA Polymerase ver.2.0 (8 U/μl)	0.3 - 1 μl^*2
Sample^*3	e.g. 2 μl

Total	25 μl

60～65℃孵育30分钟。^*4

*1 FIP/BIP primers : 16 μM、F3/B3 primers : 2 μM、LoopF/B primers : 8 μM
*1、2、4 根据目的基因和引物的序列优化反应体系，包括引物和酶的浓度，以及反应温度和时间。高浓度的酶会减少检测（扩增）时间，但是有增加非特异性扩增的风险。强烈建议加入无模板的对照反应，以确保反应结果的特异性。
*3 为了防止在制备过程中发生非特异性反应，样品应该最后添加。如果以RNA为模板，添加Reverse Transcriptase XL（AMV）（5 U/μl）至终浓度为0.04 U/μl。

注意：反应产物的检测有多种方法，例如肉眼观察颜色指示反应和实时荧光定量PCR仪做荧光检测等。可根据您的实验目的选择合适的方法。