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In-Fusion与其他公司的无缝克隆试剂对比有何不同?
 
· 阳性克隆率和克隆菌落数是衡量无缝克隆试剂的两个重要参数,虽说阳性克隆率的高低是决定无缝克隆成败的关键,但克隆菌落数的多少也是无缝克隆实验成功的重要保障!
· In-Fusion无缝克隆试剂兼具阳性克隆率高和克隆菌落数多的特点,无需反复酶切连接以及亚克隆操作,仅通过一步反应即可在15 min内实现目的片段和载体的定向克隆,大大提高了克隆实验的效率和成功率。
· 市售的很多无缝克隆试剂的原理看似与In-Fusion相同,但实际效果和实验数据却有很大的不同。例如以下对比数据:
 
■ 比较In-Fusion和A公司同类试剂盒的克隆效率(Takara Bio数据)
进行3个片段(MBP:1.1 kb、PROF12:0.7 kb、AcGFP1:0.7 kb)与2.7 kb线性载体连接的多片段克隆反应。
 
  In-Fusion HD Cloning A公司产品
反应条件 50℃,15分钟 50℃,15分钟 50℃,60分钟
载体+目的片段 89个克隆 111个克隆 392个克隆
阴性对照(无目的片段) 1个克隆 39个克隆 78个克隆
阳性克隆获得率 100%(26/26) 19%(5/26) 73%(19/26)
 
A公司产品阴性对照克隆数多,且目的克隆的获得率低,说明使用该产品虽然整体克隆多,但空载体也多。对阳性克隆菌落进行测序后发现,In-Fusion方法得到的克隆序列基本都是正确的,使用A公司的产品错误较多(数据未显示)。综上可知,使用In-Fusion方法获得含目的片段的克隆正确率更高。