灵敏度实验

 
从预扩增偏差比较实验中,可以得出结论:Prelude PreAmp Master Mix可以在不引入偏差的前提下,对100 pg的cDNA样本进行14个循环的预扩增。但实际情况中可能会遇到样本起始量非常低,甚至低至1 ng的情况,现有的商品化的预扩增试剂都没有对较低起始量样本的预扩增实验进行验证。Prelude PreAmp Master Mix试剂的性能优越,甚至可以用于低于100 pg起始的有限或珍贵的样本预扩增实验,如FFPE、液体活检或罕见的靶序列(cf/ctDNA)等。
为了证明这一点,使用Prelude PreAmp Master Mix分别对12.5 pg、50 pg或100 pg的cDNA进行14个循环的预扩增。之后通过PrimerArray Cell cycle (Human)(Code No.PH002)对样本进行分析。无论起始量是多少,所有基因都保持一致的表达,没有引入偏差。由于Prelude PreAmp Master Mix只需12.5 pg的起始量,因此它提供了高水平的灵敏度。
 
 
请注意,虽然上图显示了PrimerArray Cell Cycle (Human) panel中全部96个目的基因的定量结果,但是为了保证可读性,x轴仅显示部分基因名称。完整的目的基因定量结果,详见Excel