检出灵敏度的测定(Code No. R026A/B)

 
[方法]
以不同量的HL60细胞来源的total RNA为模板,以GAPDH基因的428 bp为目的基因进行1 Step RT-PCR, 测定检出灵敏度。
 
反应条件:
                               45℃ 10 min
                               94℃ 2 min
                                   ↓
98℃ 10 sec.   30 or 40 cycles
55℃ 15 sec.  
68℃ 10 sec.  
 
 
[结果]
Total RNA使用量10 pg(30 cycles)和100 fg(40 cycles)时能够检出。
此外, total RNA使用量为 4 μg时能够得到良好扩增,表明模板量添加范围广。