扩增片段长度的确认(Code No. R026A/B) | ||
[方法] | ||
以人心脏及小鼠心脏来源的total RNA和HL60细胞来源的total RNA为模板(1 μg/50 μl反应体系)、使用1 step RT-PCR对不同长度的目的片段进行扩增。 | ||
反应条件: | ||
45℃ 10 min(注意12 kb时为15 min.) | ||
94℃ 2 min | ||
↓ |
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98℃ 10 sec. | ![]() |
30 cycles |
55℃ 15 sec.(注意8、12 kb时为60℃) | ||
68℃ 10 sec./kb | ||
![]() |
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[结果] | ||
确认能够扩增0.5~12 kb的片段。 | ||