与TaKaRa RNA LA PCR Kit Ver. 1.1的灵敏度比较

 
[方法]
1). 将TaKaRa RNA LA PCR Kit Ver. 1.1(Code No. RR012A)中添付的Positive Control RNA(2×105 copies/μl)进行梯度稀释,使用各浓度参照实验操作方法制备反应液。
2). 按照下述程序进行反应。
 
RNA LA PCR Kit Ver. 1.1
RT反应 : 50℃ 15分、95℃ 5分、5℃ 5分
反应后,添加PCR反应液进行下一步反应
PCR反应 : 94℃ 30秒、60℃ 30秒、72℃ 1分(30 cycles)
 
One Step RNA PCR Kit(AMV)
RT反应 : 50℃ 15分、94℃ 2分
PCR反应 : 94℃ 30秒、60℃ 30秒、72℃ 1分(30 cycles)
 
(使用TaKaRa PCR Thermal Cycler MP)
 
[结果]
如图所示,One Step RNA PCR Kit(AMV)显示了与RNA LA PCR? Kit Ver. 1.1相同的灵敏度,5×102 copies也可以确认到条带。