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| 人基因组DNA为模板进行LA PCR |
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| 模板 DNA： |
人基因组DNA |
| Target： |
β-globin cluster region和TPA gene region |
| 扩增大小： |
17.5 kb β-globin cluster region |
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21.5 kb β-globin cluster region |
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27 kb PA gene region |
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| 反应液组成 |
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反应液量 |
终浓度 |
| 人基因组DNA (500 ng/μl) |
1 μl |
500 ng/50 μl |
| 10 × LA PCR Buffer II (Mg2+ plus) |
5 μl |
［1×］ |
| dNTP Mixture |
8 μl |
各400 μM |
| Sense Primer (20 pmol/μl) |
0.5 μl |
0.2 μM |
| Antisense Primer (20 pmol/μl) |
0.5 μl |
0.2 μM |
| TaKaRa LA Taq |
0.5 μl |
2.5 U/50 μl |
| 灭菌水 |
34.5 μl |
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| Total |
50 μl |
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| 50 μl矿物油层 |
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| PCR条件【使用TaKaRa PCR Thermal Cycler TP480】 |
| 94℃ 1 min |
↓
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| 98℃ 20 sec |
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14 cycles |
| 68℃ 20 min |
↓
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| 98℃ 20 sec |
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16 cycles |
| 68℃ 20 min + 15 sec/cycle |
↓
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| 72℃ 10 min |
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| 结果 |
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京公网安备 110114000405号