直接PCR例7:口腔细胞悬浮液

MightyAmp DNA Polymerase Ver.2 (Code No. R071A/B)
 
 
· 口腔细胞悬浮液的制备方法
   (1) 用灭菌棉棒在脸颊内侧擦拭10次。
   (2) 将棉棒放入到已装有Buffer(A或B)的反应管中搅拌5次,在管壁按压棉棒。
· Buffer A:TE Buffer 300 μl
   Buffer B:TE Buffer 300 μl+20 mg/ml Protinase K 1.5 μl
   (3) 使用Buffer B的检测样品,为了使Proteinase K失活,98℃处理2分钟。
· 将制备的口腔细胞悬浮液(0.5 μl、1 μl及2 μl)直接添加到反应体系中(20 μl)
· 目的基因:p53基因 515 bp
· PCR反应条件
                  98℃ 2 min.  
                       ↓
98℃ 10 sec   35 cycles
60℃ 15 sec  
68℃ 30 sec  
 
· 使用TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice Gradient(Code No.TP600)
· 电泳上样量:3 μl
· 凝胶:1% Agarose L03 「TAKARA」