| 直接PCR例7：口腔细胞悬浮液 | ||||||
| MightyAmp DNA Polymerase Ver.2 （Code No. R071A/B） | ||||||
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| · 口腔细胞悬浮液的制备方法 (1) 用灭菌棉棒在脸颊内侧擦拭10次。 (2) 将棉棒放入到已装有Buffer（A或B）的反应管中搅拌5次，在管壁按压棉棒。 |
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| · Buffer A：TE Buffer 300 μl Buffer B：TE Buffer 300 μl＋20 mg/ml Protinase K 1.5 μl (3) 使用Buffer B的检测样品，为了使Proteinase K失活，98℃处理2分钟。 |
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| · 将制备的口腔细胞悬浮液（0.5 μl、1 μｌ及2 μl）直接添加到反应体系中（20 μl） | ||||||
| · 目的基因：p53基因 515 bp | ||||||
| · PCR反应条件 | ||||||
| 98℃ 2 min. | ||||||
| ↓ |
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| 98℃ 10 sec |  |
35 cycles | ||||
| 60℃ 15 sec | ||||||
| 68℃ 30 sec | ||||||
| · 使用TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice Gradient（Code No.TP600） | ||||||
| · 电泳上样量：3 μl | ||||||
| · 凝胶：1% Agarose L03 「TAKARA」 | ||||||
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