Takara

使用LA PCR用Genome DNA Set进行LA PCR

利用LA PCR用Genome DNA Set中的各DNA和相应的Primer set，使用TaKaRa LA Taq进行了PCR扩增。

■ 反应液组成

	使用量	终浓度
genome DNA	1 μl	human genome：500 ng E.coli genome：100 ng
10×LA PCR Buffer II (Mg²⁺ free)	5 μl	×1
25 mM MgCl2	5 μl	2.5 mM
dNTP Mixture	8 μl	400 μM each
Primer #1	1 μl	0.2 μM
Primer #2	1 μl	0.2 μM
TaKaRa LA Taq	0.5 μl	2.5 U/50 μl
灭菌水	up to 0.5 μl	2.5 U/50 μl

■ 操作时的注意事项

· 试剂盒中的试剂在室温～37℃下完全融解后，充分吸打混合或上下颠倒混合。避免振荡混合。10×LA PCR Buffer、
TaKaRa LA Taq吸打混合时要注意防止气泡产生及酶的失活。此外，试剂使用前在冰上保存。

· 配制的反应液在反应前轻轻吸打混合。绝对不能振荡混合。

■ PCR条件

■ 结果

（Takara Bio Inc.比较数据）

Thermal Cycler：TaKaRa PCR Thermal Cycler MP

gel：3% NuSieve 3：1 Agarose gel

上样量：8 μl/50 μl