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| 亨廷顿氏病基因的扩增 |
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| 使用TaKaRa LA Taq（分别与GC Buffer和以往的LA PCR Buffer组合使用）、B公司的GC Kit，对廷顿氏病基因（HD基因IT15 CAG序列重复；片段大小262 bp/GC含量73%、358 bp/GC含量71.5%）进行了PCR扩增和比较。结果显示，使用以往的LA PCR Buffer及B公司的GC Kit均无扩增片段，而使用GC Buffer的TaKaRa LA Taq可检测出2个片段。 |
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| ■ PCR反应条件 |
| 使用TaKaRa LA Taq时 |
| 94℃ 1 min |
↓
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| 94℃ 30 sec. |
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30 cycles |
| 60℃ 30 sec. |
| 72℃ 1 min. |
↓
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| 72℃ 5 min |
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| B公司GC Kit（按照说明书进行操作） |
| 94℃ 1 min |
↓
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| 94℃ 30 sec. |
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30 cycles |
| 68℃ 3 min. |
↓
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| 68℃ 3 min |
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| ■ 结果 |
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| 反应液加量 |
反应液加量 |
反应液加量 |
终浓度 |
| 1： |
TaKaRa LA Taq |
10×LA PCR Buffer |
100 ng |
| 2： |
2×GC Buffer I |
100 ng |
| 3： |
2×GC Buffer II |
100 ng |
| 4： |
B公司GC Kit |
同款试剂盒中附带的Buffer |
100 ng |
| M： |
100 bp DNA Ladder Marker |
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| （Takara Bio Inc.比较数据） |
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| Thermal Cycler：TaKaRa PCR Thermal Cycler MP |
| gel：3% NuSieve 3：1 Agarose gel |
| 上样量：8 μl/50 μl |
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