Pyrobest DNA Polymerase、TaKaRa Taq及A公司Hot start用Taq的比较

 
使用Pyrobest DNA Polymerase、TaKaRa Taq以及A公司Hot start用Taq对p53基因5 kb(模板量:各200 ng)进行扩增、进行了比较研讨。结果显示TaKaRa Taq以及A公司Hot start用Taq未能扩增得到目的片段。然而使用Pyrobest DNA Polymerase不使用Hot start法也能够抑制非特异性扩增,得到目的基因的扩增产物。
这可能是由于Pyrobest DNA Polymerase相比于TaKaRa Taq的最适反应温度高,在65℃以下时聚合酶活性较低,而在温度升高到65℃以上时活性急剧上升。
 
 
Thermal Cycler:TaKaRa PCR Thermal Cycler MP
凝胶:1% Agarose L03「TAKARA」
上样量:8 μl/50 μl
 
 
以上实验结果来源于Takara Bio, Inc.