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Tks Gflex DNA Polymerase

高效制备克隆用插入片段
人心脏来源的total RNA,使用PrimeScript II 1st strand cDNA Synthesis Kit(Code No. 6210A)进行反转录反应制备了cDNA。以制备的2 μl cDNA(相当于500 ng total RNA)为模板,为了使20种基因的全长ORF克隆于pCMV-HA-C载体中,使用依据In-Fusion原理设计的Primer和Tks Gflex进行PCR扩增。使用Tks Gflex,20种目的基因的ORF在标准反应条件下全部可扩增。
所有20种目的基因都可以使用Tks Gflex获得扩增结果,在大幅提高克隆效率中发挥着作用。
 
 
M:250 bp DNA Ladder  M2:λ-Hind III digest。
 
目的基因列表:
 
Tks Gflex的PCR条件: 94℃ 1 min
                         ↓
98℃ 10 sec.   35 cycles
55℃ or 60℃ 15 sec.  
68℃ 30 sec./kb  
 
上述所有实验数据来源于Takara Bio, Inc.