|
■ 操作步骤 |
|
<反应液组成> |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
琼脂糖凝胶电泳
使用QuickCut Green Buffer,直接进行电泳
使用QuickCut Buffer添加Loading buffer后电泳
|
|
|
|
|
线性DNA |
质粒DNA |
PCR产物 |
10X QuickCut Buffer*或
10X QuickCut Green Buffer* |
1 μl-5 μl |
1 μl-5 μl |
1 μl-3 μl |
DNA |
≤1 μg |
≤1 μg |
≤0.2 μg |
QuickCut Dra I (Aha III) |
1 μl |
1 μl |
1 μl |
灭菌水 |
Up to 10 μl-50 μl |
Up to 10 μl-50 μl |
Up to 10 μl-30 μl |
|
|
|
*:反应体系不同,10X Buffer的添加量不同,请确保终浓度为1X。 |
|
|
1 μl QuickCut Dra I (Aha III) 的酶切反应 |
热失活
条件 |
QC data |
Linear Substrate (λ DNA) |
Plasmid DNA (pBR322) |
PCR Product |
不产生Star
Activity的时间 |
Labeled Oligonucleotide Assay(LOA) |
切断时间(min) |
切断效率 |
切断时间(min) |
切断效率 |
切断时间(min) |
切断效率 |
5 |
100% |
5 |
100% |
5 |
100% |
60℃,15 min |
16 hr |
<10% |
|
|
|
|