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PrimeSTAR^® GXL DNA Polymerase

反应灵敏度与模板使用量范围

一般高保真PCR聚合酶容易受到反应液中剩余核酸量的影响，因此以cDNA为模板的扩增比较困难。而PrimeSTAR GXL DNA Polymerase对模板使用范围的适用性变得更宽，可以进行以cDNA为模板的高效PCR反应。

（1）使用各种浓度的HL60细胞来源Total RNA进行反转录反应后获得的cDNA作为模板，分别使用PrimeSTAR系列聚合酶扩增4 kb的transferrin receptor（TFR）基因，并对反应灵敏度和模板量的使用范围进行了比较。

50 μl反应体系中模板cDNA 的使用量（相当于Total RNA的量）

1. 25 pg	7. 750 ng
2. 250 pg	8. 1 μg
3. 2.5 ng	9. 1.5 μg
4. 25 ng	10. 2 μg
5. 250 ng	M. λ-Hind III digest
6. 500 ng

使用PrimeSTAR GXL DNA Polymerase可以在宽广的浓度范围内对cDNA进行良好的扩增，说明本制品具有良好的反应灵敏度及宽广的模板添加量范围。

（2）以不同使用量的人基因组DNA为模板，对PrimeSTAR GXL和各公司的高保真PCR酶及rTaq的扩增效率进行了比较。

50 μl反应体系中的模板使用量
1. 无模板	模板：人基因组DNA
2. 100 pg	靶基因：DCLRE 1A基因（2 kb）
3. 1 ng	以各公司推荐的反应条件进行了PCR反应
4. 10 ng
5. 100 ng
6. 200 ng
7. 500 ng
M. λ-Hind III digest

从以上结果可以看出，PrimeSTAR GXL DNA Polymerase比其他公司的高保真PCR酶及rTaq具有更高的反应灵敏度和更好的扩增性能。同时其他公司的高保真PCR酶存在由于模板使用量过多导致PCR反应受到抑制的现象，而在相同条件下使用PrimeSTAR GXL DNA Polymerase却可以获得良好的扩增结果。