Takara

PrimeSTAR HS^® DNA Polymerase

与其他公司High-Fidelity酶的品质比较

目前市场上销售的PCR酶大部分是经过克隆转化到E.coli中进行表达后，分离提取得到的，有可能发生内源性E.coli基因组DNA的污染。因此纯化时实验中使用E.coli来源的DNA混入量最低的高品质的酶尤为重要。

下面是为了检测PrimeSTAR HS DNA Polymerase和其他公司的High-Fidelity PCR酶的E.coli基因组DNA污染程度，在ori区域进行了巢式PCR的验证例。

使用PrimeSTAR HS DNA Polymerase时没有确认到E.coli基因组DNA的污染（下图A）。而其他公司的High-Fidelity PCR酶在没有添加模板的反应体系中在ori区域确认到143 bp的扩增产物（下图B）。从以上结果可以看出，PrimeSTAR HS DNA Polymerase中残留的E.coli基因组DNA量不满100 fg，质量高于其他公司的High-Fidelity PCR酶。

(A) 使用PrimeSTAR HS DNA Polymerase

(B) 使用其他公司High-Fidelity PCR酶

认为Lane7、8的扩增片段是残留E.coli基因组DNA的扩增片段

图 E. coli ori区域的nested PCR比较

扩增区域：	E. coli ori region
扩增片段大小：	2nd PCR 143 bp
Lane M：	100 bp DNA Ladder
Lane 1～6：	(无模板DNA)
Lane 7：	添加1 fg E. coli JM109基因组DNA
Lane 8：	添加10 fg E. coli JM109基因组DNA
Lane 9：	添加100 fg E. coli JM109基因组DNA
Lane 10：	添加1 pg E. coli JM109基因组DNA

在1st PCR时，Lane7～10作为阳性对照分别添加1 fg、10 fg、100 fg、1 pg的E. coli JM109基因组DNA后进行了nested PCR。