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PrimeSTAR HS® DNA Polymerase

以cDNA为模板的PCR
 
   以人心脏total RNA利用M-MLV RTase的反转录扩增产物为模板进行了PCR反应。
   以反转录后的cDNA为模板时,同其他公司High-Fidelity PCR酶相比,PrimeSTAR HS DNA Polymerase可有效进行PCR扩增(下图)。
 
(A)使用PrimeSTAR HS DNA Polymerase          (B)使用其他公司High-Fidelity PCR酶
图 PrimeSTAR HS DNA Polymerase与其他公司High-Fidelity PCR酶的扩增效率比较(以反转录产物为模板)
 
检测样品:    人心脏total RNA的反转录产物
目的基因片段大小:    2 kb
模板量:    各种浓度total RNA进行反转录反应后,从20μl反转录反应液中取5μl作为模板。
PCR仪:    TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice(Code No. TP650)
PCR条件:    98℃、10sec.    30 Cycles
   55℃、15sec
   72℃、2min
* 其他公司High-Fidelity PCR酶的反应条件按照其推荐的操作流程进行了PCR反应。
 
Lane M:   λ-Hind III digest
1:   相当于50 pg total RNA
2:   相当于500 pg total RNA
3:   相当于5 ng total RNA
4:   相当于50 ng total RNA
5:   相当于100 ng total RNA
6:   相当于250 ng total RNA