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PrimeSTAR HS® DNA Polymerase |
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以cDNA为模板的PCR |
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以人心脏total RNA利用M-MLV RTase的反转录扩增产物为模板进行了PCR反应。 |
以反转录后的cDNA为模板时,同其他公司High-Fidelity PCR酶相比,PrimeSTAR HS DNA Polymerase可有效进行PCR扩增(下图)。 |
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(A)使用PrimeSTAR HS DNA Polymerase (B)使用其他公司High-Fidelity PCR酶 |
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图 PrimeSTAR HS DNA Polymerase与其他公司High-Fidelity PCR酶的扩增效率比较(以反转录产物为模板) |
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检测样品: |
人心脏total RNA的反转录产物 |
目的基因片段大小: |
2 kb |
模板量: |
各种浓度total RNA进行反转录反应后,从20μl反转录反应液中取5μl作为模板。 |
PCR仪: |
TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice(Code No. TP650) |
PCR条件: |
98℃、10sec. |
30 Cycles |
55℃、15sec |
72℃、2min |
* 其他公司High-Fidelity PCR酶的反应条件按照其推荐的操作流程进行了PCR反应。 |
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Lane M: |
λ-Hind III digest |
1: |
相当于50 pg total RNA |
2: |
相当于500 pg total RNA |
3: |
相当于5 ng total RNA |
4: |
相当于50 ng total RNA |
5: |
相当于100 ng total RNA |
6: |
相当于250 ng total RNA |
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