Takara

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TaKaRa LA Taq^™

GC rich序列重复序列的扩增
―亨廷顿氏病基因的扩增―

使用TaKaRa LA Taq（分别与GC Buffer和以往的LA PCR Buffer组合使用）、B公司的GC Kit，对亨廷顿氏病基因（HD基因IT15 CAG序列重复；片段大小262 bp/GC含量73%、358 bp/GC含量71.5%）进行了PCR扩增和比较。结果显示、使用以往的LA PCR Buffer及B公司的GC Kit均无扩增片段，而使用GC Buffer的TaKaRa LA Taq可检测出2个片段。

■ PCR反应条件

使用TaKaRa LA Taq 时

94℃、1 min
↓
94℃、30 sec		30 cycles
60℃、30 sec
72℃、1 min
↓
72℃、5 min

使用B公司GC Kit（按照说明书进行操作）

94℃、1 min
↓
94℃、30 sec		30 cycles
60℃、3 min

↓
68℃、3 min

■ 结果

Thermal Cycler：TaKaRa PCR Thermal Cycler MP

凝胶：3% Agarose gel

上样量：8 μl/50 μl

泳道	酶	Buffer	template量
1：	TaKaRa LA Taq	10×LA PCR Buffer	100 ng
2：		2×GC Buffer I	100 ng
3：		2×GC Buffer II	100 ng
4：	B公司GC Kit	同款试剂盒中附带的Buffer	100 ng
M：	100 bp DNA Ladder Marker