Takara

PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time)

cDNA合成效率的比较

[方法]

使用梯度稀释的Total RNA作为模板，使用本制品 (Code No. RR047A)、T公司同类型制品以及PrimeScript RT Master Mix (Perfect Real Time) (Code No. RR036A)，分别按照各自制品推荐的条件进行反转录反应、qPCR反应，将结果进行比较。

模板：	HL60细胞来源的Total RNA
	(0，1 pg，10 pg，100 pg，1 ng，10 ng，100 ng，1 μg)
qPCR：	TB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR820A)
qPCR的模板：	反转录反应液各2 μl
目的基因：	RPLP1
Primer：	利用Perfect Real Time系统设计
qPCR装置：	Thermal Cycler Dice Real Time System II (Code No. TP900)

[结果]

RR047A的cDNA合成效率与不进行基因组DNA去除的RR036A的效率相当，比T公司同类型制品的cDNA合成效率高。另外，RR047A比T公司制品反应时间短。

	RR047	T公司同类制品
DNA去除反应	42℃ 2分钟	37℃ 5分钟
反转录反应	37℃ 15分钟	37℃ 15分钟 50℃ 5分钟
反转录反应	85℃ 5秒	98℃ 5分钟
反应时间	约17分钟	约30分钟

本公司比较结果。