Takara

PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time)

Total RNA中混有基因组DNA的去除效果验证

[方法]

Total RNA中混入一定量的基因组DNA作为模板，使用本制品 (Code No. RR047A) 与PrimeScript RT Master Mix (Perfect Real Time) (Code No. RR036A)，分别按照各自制品推荐的条件进行反转录反应后，再进行qPCR反应，对其结果进行比较。

模板：	HL60细胞来源的Total RNA (0，1 pg，10 pg，100 pg，1 ng，10 ng，100 ng，1 μg) + Human genomic DNA 1 ng
qPCR：	TB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR820A)
qPCR的模板：	反转录反应液各2 μl
目的基因：	RPLP1
Primer：	利用Perfect Real Time系统设计 (内参大小：129 bp)
qPCR装置：	Thermal Cycler Dice Real Time System II (Code No. TP900：终卖)

[结果]

即使含有基因组DNA的Total RNA，使用RR047A中含有的gDNA Eraser处理，可以完全去除基因组DNA，只能得到cDNA来源的扩增产物。