Takara

无标题文档

PrimeScript^™ One Step RT-PCR Kit Ver.2

PrimeScript One Step RT-PCR Kit Ver.2操作方法

1. 按下列组成配制RT-PCR反应液。

试剂	使用量	终浓度
PrimeScript 1 Step Enzyme Mix	2 μl
2×1 Step Buffer	25 μl
上游Primer（20 μM）^*1（sense）	1 μl	0.4 μM
下游Primer（20 μM）^*2 （anti-sense）	1 μl	0.4 μM
Template RNA （or Positive Control RNA	X μl^*3 1 μl）
RNase Free dH2O	UP to 50 μl

*1 Positive Control RNA时使用 F-1 Primer。
*2 Positive Control RNA时使用 R-1 Primer。
*3 Total RNA的使用量建议在1 μg以下。

2. 按以下条件进行RT-PCR反应。

Standard Condition

（A）进行3 Step PCR 反应时：

（B）进行2 Step PCR 反应时：

Positive Control RNA反应时：

* Positive Control RNA反应时可以确认到462 bp的PCR扩增产物