| 组织材料 | 起始样品量 | Small RNA提取量 |
| 肝脏 | 100 mg | 约50 μg |
| HL-60培养细胞 | 1×107个 | 约15 μg |
| 骨骼肌 | 100 mg | 约15 μg |
260 nm、320 nm、230 nm、280 nm下的吸光度分别代表了核酸、背景（溶液浑浊度）、盐浓度和蛋白质等有机物的吸光度值。OD260/OD280（R）体现了RNA中的蛋白质等有机物的污染程度，质量较好的RNA的R值应在1.8～2.2之间，当R<1.8时，溶液中的蛋白质等有机物的污染比较明显；当R> 2.2时，说明RNA已经被水解成了单核苷酸。
在对核酸进行吸光度检测时，需要注意稀释液应使用TE Buffer。
RNA浓度=（OD260-OD320）×稀释倍数×0.04 μg/μl。
① 向组织材料中加入RNAiso for Small RNA后，请充分研磨匀浆使其充分裂解。
② 相分离后请尽量完全回收上清液。
③ 增加起始组织加量，并成比例添加RNAiso for Small RNA。
① 75%乙醇清洗沉淀后不要干燥时间过长或加热干燥。
② 可以于60℃加热5分钟后再于冰上溶解数小时。
③ RNA沉淀中含有不溶的蛋白质混合物时，应注意在相分离后吸取上清液时，避免枪头接触蛋白层。
④ 溶解液更换为0.5%的SDS溶液（DEPC处理水配制）。
① RNA应使用TE Buffer稀释后再进行吸光度值的测定，低离子强度或低pH值会使OD280值升高。
② 样品裂解时加入的RNAiso for Small RNA量偏少，造成蛋白质变性不充分，可以再次对Small RNA溶液进行苯酚/氯仿抽提，以除去蛋白质。
③ 含有裂解液的样品经匀浆混匀后未在室温静置，或静置的时间不足5分钟。
④ 相分离后，吸取上清液时不小心接触蛋白层造成污染。
⑤ RNA未充分溶解。
① 使用的组织材料不够新鲜。提取RNA的组织材料应采用新鲜的组织材料，或将新鲜的组织材料用液氮迅速冷冻后置于-80℃保存。
② 提取RNA时使用的试剂及器材中混有RNA分解酶。
③ 提取的组织材料中含有大量的RNA分解酶，而RNAiso for Small RNA的添加量不够。
① 裂解组织或细胞使用的RNAiso for Small RNA量偏少。
② 使用的组织材料中含有大量的有机溶剂（如：乙醇、异丙醇等）、高浓度的Buffer、碱性溶剂等。
③ 如果提取的RNA中含有DNA时，可以使用Recombinant DNase I（RNase-free）(Code No．2270A）进行DNA消化。
页面更新：2020-05-06 11:36:36
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