组织材料 | 起始样品量 | Total RNA提取量 |
人全血 | 0.25 ml | 1~10 μg |
小鼠全血 | 0.25 ml | 1~10 μg |
牛全血 | 0.25 ml | 1~10 μg |
鲤鱼全血 | 0.25 ml | 10~100 μg |
菠菜叶片 | 50 mg | 30~60 μg |
西红柿果实 | 50 mg | 1~10 μg |
橘子 | 50 mg | 1~10 μg |
1.RNA应使用TE Buffer稀释后再进行吸光度值的测定,低离子强度或低pH值会使OD280值升高。
2.样品加入RNAiso Blood经匀浆后,在室温静置5分钟,这一步是从核酸中分离核蛋白的重要步骤。
3.吸取上清液时,注意枪头不要接触中间蛋白质层。
4.提取的RNA未充分溶解。
1.若75%乙醇清洗沉淀后干燥时间过长,则RNA沉淀会难以溶解。避免加热或长时间干燥沉淀。
2.可以于60℃加热5分钟后再于冰上溶解数小时可有助于沉淀溶解。
1.RNA提取用样品,应采用新鲜的组织材料,或将新鲜的组织材料用液氮迅速冷冻后置于-80℃保存。
2.提取RNA时使用的样品及器皿中混有RNA分解酶。
1.使用的样品中含有大量的有机溶剂(如:乙醇、异丙醇等)、高浓度的缓冲液、碱性溶剂等。
2.如果提取的RNA中含有DNA时,可以使用Recombinant DNase I (RNase-free)(Code No. 2270A)进行DNA消化。
对于从含有大量多糖的植物样本中提取RNA时,建议使用Fruit-mate™ for RNA Purification (Code No. 9192)作为预处理试剂。在异丙醇沉淀纯化步骤中加入High-Salt Solution for Precipitation(Plant)(Code No. 9193)可有效除去RNA溶液中的多糖。
页面更新:2020-05-06 10:18:04