当载体与插入的DNA片段的总长度小于5 kb时,使用本试剂盒较为合适;如果载体与插入DNA片段长度太长时,不推荐使用本试剂盒。
PCR反应后的DNA片段应进行切胶回收纯化,然后再进行自身连接反应,这样可以提高突变成功率。
Ligation Solution I请于冰中融解,使用前混匀。应避免多次反复冻融。
可以从以下两方面进行改进:
1. 确认感受态细胞的转化效率。
2. 延长连接反应时间至过夜反应。
页面更新:2020-04-27 14:15:35