首先请按说明书要求进行Control反应，如果Control反应情况正常，那说明实验操作没有问题。此时请从提取的RNA样品的纯度和添加量、基因的表达丰度、基因的长度和GC含量、引物的设计情况、参考文献的可信度以及RT-PCR条件的设定等方面加以考虑；如果Control反应不正常，应从实验操作的准确性以及实验器具处理等方面进行考虑。
在1×cDNA Dilution Buffer II和RT反应液中均含有dNTP Mixture，可以足够满足PCR反应的需要，所以不需再添加dNTP Mixture。
不是单一条带的可能原因如下：
1．可能是因为mRNA不同的拼接方式造成的；
2．可能是因为多种Poly(A)+位点的存在造成的；
3．可能是因为扩增的基因为多基因家族的成员；
4．可能是因为未知序列信息不清楚导致了非特异性扩增。
反转录反应液的使用量可控制在0.5 μl～10 μl的范围。
页面更新：2020-04-26 14:46:31
京公网安备 110114000405号