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机构用户解决方案

产品选择指南

技术服务信息

Q-1:什么是Mate&Plate文库?
A-1:

Mate&Plate文库是用于酵母双杂交筛选的已经将文库转化到MATα型单倍体酵母菌株(Y187)中的预分装文库。通过与表达bait的MATa型酵母双杂报告菌株(Y2HGold和AH109)接合及涂板的方法即可筛选阳性克隆。实验时只要将Y2HGold bait菌株采用SD/-Trp培养基过夜培养16-20小时使其OD600≥0.8,第二天将该菌液与滴度满足要求的1管文库混合,继续过夜培养20-24小时使两种酵母菌接合形成二倍体后将二倍体细胞涂布在SD/-Leu/-Trp/X-α-Gal/AbA的平板上筛选阳性互作克隆即可。

Q-2:如何自己制备文库?
A-2:

强烈推荐使用Make your Own“Mate & Plate” Library System(制品Code:630490)自己构建文库。Mate&Plate方法是最简单的酵母双杂交文库构建方法和最容易的筛选方法。

Q-3:如何判断现有的文库是否可以用于Matchmaker Gold?
A-3:

   Clontech没有验证其他来源的酵母双杂交文库,但是,原则上任意文库/prey载体在满足以下条件
   下,都可以用于Matchmker Gold:
   · 兼容S. cerevisiae
   · 带有GAL4转录激活域;
   · 可以采用LEU2标记进行筛选。