In-Fusion Cloning Kits不依赖于连接酶，可以在任意线性化载体的任意位点定向插入PCR产物。
In-Fusion是简单快速单管操作的克隆方法。
根据In-Fusion酶特殊的性质，插入片段和载体在同源序列 (15个碱基)处融合。这与一般的同源重
组是有差异的，因此克隆不再有位置和空间的限制。
在保留原始In-Fusion PCR Cloning System的所有优点之外，In-Fusion HD Cloning System
包含更为粗放型的In-Fusion酶，可以有效提高克隆效率，尤其是长片段、短寡核苷酸链和多片段
克隆。另外升级后In-Fusion酶不再需要稀释处理即可方便地储存在-20℃。EcoDry™冻干粉形式产
品可以储存在室温条件下。
使用任何PCR酶均可，建议使用高保真PCR扩增酶。
没有特别的限制。无论是平滑末端、粘性末端或者末端有无A尾均可进行有效的连接反应。
如果盈利单位是用于基础研究，不需要取得专利许可。目前本试剂盒已经受到很多企业和研究人员
的青睐。
Clontech目前还没有发现采用In-Fusion酶会发生碱基滑动、碱基添加、碱基缺失的现象。我们克隆
了超过4,000个克隆子并对其进行了测序，这4,000个克隆子包含了多种人类开放读码框，在克隆连
接位点上几乎没有发现任何错误（<2%）。目前发现的序列错误大部分都是由于错误的引物合成所
引起的（也就是说，序列错误出现在所有或者多数克隆包含一个特定的插入片段的情况下）。
In-Fusion是实现无错融合构建的理想选择。
In-Fusion可以进行多重片段的克隆并且已证实非常有效(Zhu et. Al., 2007)。这个过程明显比将多
个片段克隆到同一载体的其他方法速度要快（比如，这是一个多重载体修饰的有效方法）。克隆操
作可以一步完成。需要注意的是多重片段克隆效率无疑要低于单片段克隆效率。因此，您可以通过
筛选更多的克隆来获得目标产物。以下是采用In-Fusion进行此类实验的参考文献：
· Fujiwara, K. et al. (2005) J. Biol. Chem. 280(69):33,645–33,651.
· Zhu, B. et al. (2007) BioTechniques 43(3):354– 359.
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