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Takara IVTpro T7 mRNA Synthesis Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 6144 Takara IVTpro T7 mRNA Synthesis Kit 20 Rxns ¥3,442
¥2,926

*红字为促销价格,促销时间: 2025年3月1日-2025年5月31日

 
一款合成高质量、高产量mRNA的体外转录(IVT)试剂盒
·通过体外转录(IVT)合成带有Cap结构和Poly(A)序列的mRNA;※ Cap类似物不包含在本产品中
·优化的T7 RNA聚合酶用于IVT反应,RNA合成效率高、产量大;
·独立包装的NTPs,方便修饰NTPs替换,且不影响mRNA产量;
·采用In-Fusion无缝克隆,轻松构建模板质粒DNA;
·使用氯化锂(LiCl)溶液进行RNA纯化,可立即进行下游应用。
 
■ 制品说明
本试剂盒以含有 T7 启动子序列的双链 DNA 为模板,使用优化的高效T7 RNA聚合酶,通过体外转录可合成大量mRNA。除此以外,还包含用于IVT反应后消化模板DNA的DNase I和用于纯化mRNA的氯化锂 (LiCl) 溶液。真核细胞翻译蛋白质需要RNA的5'端有Cap结构,本试剂盒配合使用CleanCap Reagent AG(TriLink公司的Cap类似物)可以高效制备具有Cap结构的mRNA。另外,试剂盒包含单独的NTPs,方便优化或使用修饰NTPs如假尿苷替换,而且不会明显降低mRNA的产量。使用本产品,每次反应(20 μl 反应体系)可以合成高达 200μg 或更多的RNA。可以根据需要放大反应体系,即使使用10倍(200μl)反应体系也不影响mRNA预期产量(请参考说明书实验例)。※Cap类似物不包含在本产品中,请另外准备CleanCap Reagent AG (TriLink公司)。
 
■ 用途
· 用于体外转录(IVT)模板质粒DNA的构建
· 配合使用TriLink公司的CleanCap Reagent AG体外转录合成mRNA
· 使用其它Cap类似物如Anti-Reverse Cap Analog (ARCA)合成带帽结构的mRNA
(* 请注意,使用ARCA时,需要设计与本产品不同的模板序列。)
· 用于长链非编码RNA(Long non-coding RNA)的合成
· 向导RNA(guide RNA)的合成
· siRNA前体的合成
· 用于RT-qPCR的RNA标准模板的合成
· RNA探针的合成
 
■ 制品内容
Takara IVTpro T7 mRNA Synthesis Kit(Code No. 6144)(20次量、20 μl反应体系)
 
产品组分 体积量 件数/Kit
1. 10X Transcription Buffer  40 μl 1
2. 10X ATP  40 μl 1
3. 10X CTP  40 μl 1
4. 10X GTP  40 μl 1
5. 10X UTP  40 μl 1
6. 10X Enzyme Mix  40 μl 1
7. Nuclease-Free Water  1 ml 3
8. DNase I  80 μl 1
9. Lithium Chloride Precipitation Solution  600 μl 1
10. Positive Control Template (FLuc) (0.5 μg/μl)2  10 μl 1
 
*2:由T7 启动子 + 5'UTR + FLuc-CDS + 3'UTR + Poly (A) 序列组成的线性质粒DNA。
 
■ 实验操作注意事项
· 本制品是通过IVT反应合成RNA的试剂。如果双链DNA模板、试剂、试管、微量移液器吸头或反应中使用的其他材料混入RNase污染,会导致使用本试剂盒获得的RNA收量降低或片段化。在反应中使用专用试管和微量移液器吸头,并戴上新的一次性手套以防止RNase污染。
· 10X Enzyme Mix 不要剧烈搅拌。
· 使用前将Lithium Chloride Precipitation Solution在室温下融化。融解后,如果充分混合后仍可见沉淀,可37℃保温溶解。如果仍有沉淀物,请直接使用,对性能没有影响。
 
■ 保存
-20℃
 
■ 试剂盒以外的其它必要试剂(主要试剂)
· CleanCap Reagent AG(TriLink公司)
· 修饰NTPs
· 限制酶(Hind III等等)
 
■ 载体信息 Positive Control Template(FLuc)
序列信息(fasta格式):点此进行下载
 
Positive Control Template(FLuc)(4,574 bp)
 
NeoR/KanR: 193~987
Ori: 1,312~1,900
CMV enhancer: 2,001~2,380
CMV promoter: 2,381~2,584
 
T7 promoter sequence: 2,629~2,645
Transcription Start Sequence (AGG): 2,646~2,648
5’UTR: 2,649~2,699
FLuc CDS: 2,700~4,352
3’UTR: 4,353~4,465
Poly(A)105: 4,466~4,570 (FLuc Control Fragment-derived sequence: 2,685~4,367)
 
Linearized site by Hind III (5' overhangs) : 4,569 (4,573)
 
<T7启动子后序列的详细信息>
 
 

页面更新:2025-03-10 15:59:11