mRNA疫苗 - Takara

机构用户解决方案

产品选择指南

一般PCR相关制品

PCR Enzyme的选择 PCR原理说明 Takara优选酶多功能酶高保真酶：PrimeSTAR系列基本PCR：Taq系列 Powerful PCR：MightyAmp系列直接电泳的酶制品特殊用途：多重PCR，防污染等高端PCR酶（Clontech） DNA PCR相关制品 RNA PCR相关制品 PCR Subtraction相关制品 PCR仪器
等温扩增相关制品

等温扩增酶
定量PCR相关制品

qPCR学习中心 qPCR套装反转录反应（qPCR专用）反转录反应试剂(Clontech) 嵌合荧光法检测(Takara) 嵌合荧光法检测(Clontech) miRNA 嵌合荧光法检测探针检测 Cycleave探针检测 qPCR－仪器 qPCR Primer qPCR－RNA/DNA的制备
cDNA合成 & 克隆

克隆学习中心 DNA Ligation TA克隆和平滑末端克隆 In-Fusion无缝克隆 cDNA合成&文库构建 SMART全长cDNA合成&文库构建 Random Mutagenesis Site-Directed Mutagenesis 基因组DNA序列调取试剂盒 Vector（克隆用）感受态细胞修饰酶/Ligases 修饰酶/磷酸酶、激酶修饰酶/DNA & RNA Polymerase 修饰酶/焦磷酸酶修饰酶/RTase、RNase Inhibitor 修饰酶/核酸酶、拓扑异构酶 Nucleotide Buffer（Powder）etc. 用于mRNA生产的酶（HQ级） Others（基因工程相关制品）
NGS相关制品

NGS 学习中心单细胞 RNA-Seq 单细胞 DNA-Seq RNA-Seq DNA-Seq 生殖健康表观遗传学分析免疫库分析单细胞分选系统 NGS关联制品 PCR酶（NGS用）前代RNA-Seq/DNA-Seq制品
自动化系统

自动化学习中心高通量单细胞分选系统ICELL8 cx 及其应用高通量Real-Time PCR系统自动化NGS文库制备系统高通量单细胞分选系统ICELL8应用
核酸提取、纯化及DNA标记

DNA片段、质粒DNA纯化基因组DNA纯化试剂(柱式法) 基因组DNA纯化试剂(试剂型) RNA提取、纯化试剂(柱式法) RNA提取、纯化试剂(试剂型) RNA保存试剂 Small RNA提取试剂体液样品exosome提取试剂病毒核酸纯化试剂盒酵母核酸纯化试剂盒核酸提取及纯化制品-Others DNA标记标记DNA-蛋白质的回收
限制酶

限制酶基本信息常规限制酶系列产品 QuickCut限制酶 RNA限制酶
电泳相关制品

核酸染料 DNA Markers RNA Markers 蛋白质Markers Agarose Loading Buffer 常用缓冲液方便装电泳相关装置
蛋白质互作研究（酵母杂交系统）

Takara酵母杂交学习中心 Matchmaker^® Gold酵母双杂系统 Matchmaker^® Gold酵母单杂系统互作的确认和评价 Matchmaker相关制品
表达调节及蛋白质性能分析

iDimerize^™蛋白质互作诱导系统 ProteoTuner^™蛋白质调节系统 Tet诱导表达系统
蛋白质表达相关制品

E.coli蛋白质表达 Brevibacillus/Bacillus蛋白质表达哺乳动物细胞蛋白质表达昆虫细胞蛋白质合成(Clontech) 无细胞蛋白质合成系统 Protein Refolding
蛋白质纯化、分析和检测

Capturem新型膜技术应用蛋白质样品制备 His标签融合蛋白质纯化 GST标签融合蛋白质纯化生物素标签融合蛋白质纯化 DYKDDDDK标签融合蛋白质纯化 Myc标签融合蛋白质纯化抗体纯化蛋白质IP&Co-IP 糖/磷酸化蛋白质纯化蛋白质检测蛋白质电泳胶染色蛋白质定量蛋白酶（His标签去除）蛋白酶（氨基酸序列分析）
基因导入（Virus、Vectors）

病毒基因传递系统选择向导重组慢病毒(Lentivirus)制品重组逆转录病毒(Retrovirus)制品重组腺相关病毒(AAV)制品重组腺病毒(Adenovirus)制品哺乳动物细胞用载体酵母、丝状真菌用载体植物用载体
转染试剂

Xfect转染试剂选择向导质粒转染试剂 RNA转染试剂 Protein转染试剂
干细胞研究相关制品

干细胞学习中心干细胞基因操作 (Cell reprogramming) 细胞 (Cell) 细胞培养产品 (Cell culture) 抗体 (Antibodies) 分化试剂盒和多能性监测 (Pluripotency and Differentiation ) 基因编辑（Gene Editing）
表观遗传学相关制品

甲基化DNA富集相关制品 PCR/qPCR相关制品 Control Genome DNA 甲基化DNA相关酶制品亚硫酸氢盐处理相关制品
基因组编辑相关制品

CRISPR/Cas9 Cre重组酶基因敲入用长单链DNA制备
荧光蛋白质 & 报告系统

荧光蛋白质按颜色、名称分类荧光蛋白质按用途分类荧光蛋白质相关制品报告系统
抗体 & ELISA & 细胞信号转导

细胞增殖、细胞毒性测定细胞凋亡（Takara）细胞凋亡（Clontech） EIA试剂盒（Takara）免疫染色关联制品细胞信号转导（Clontech）酶活性测定试剂盒脂肪细胞、骨细胞分化试剂抗体（Takara）
细胞 & 培养相关制品

细胞培养相关制品细胞生物学检测试剂细胞解冻仪器
microRNA & RNAi研究相关制品

RNA合成提取及纯化制品 microRNA定量PCR miRNA表达 Small RNA克隆 shRNA表达检测合成siRNA定量 RNAi相关制品
Library & cDNA & RNA

Human cDNA libraries series Mouse cDNA libraries series Rat cDNA libraries series cDNA、Genome DNA Total RNA & Poly A⁺ RNA
糖工学相关制品

糖工学酶糖工学试剂盒 Glycosphingolipid解析试剂
应用检测（食品-环境-人）

活菌DNA检测相关制品防污染相关制品食物中毒检测（PCR）食物中毒检测 (Real Time PCR) 食物中毒检测 (按Target选择) 肉种鉴定相关制品水质检测人感染症检测菌种鉴定支原体检测
仪器相关制品

PCR仪器支持中心 Q-PCR仪 E-PCR仪电泳仪器产品
Clontech相关组分信息表

Clontech相关组分信息表

技术服务信息

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mRNA疫苗研究解决方案

新冠疫情的出现让疫苗再次备受关注。作为“疫苗军团”中的一员，mRNA疫苗作为后起之秀热度不断攀升。
体外转录的mRNA应用在动物实验的首次报道是在1990年，研究人员将报告基因的mRNA注射入小鼠骨骼肌，并成功检测到蛋白质的表达。然而，由于这一时期缺少高效的mRNA递送技术，加之RNA本身的不稳定性等原因，在这一阶段的研究过后，mRNA疗法并没有走上快速发展的道路。随着相关研究的不断投入，近年来涌现的各种创新型技术让mRNA在疫苗研发领域崭露头角，表现出很好的前景。
相比灭活疫苗等前代技术平台，mRNA技术在安全性、功效表现，以及生产上均具有一定优势。mRNA不具备感染性、整合性，降低了发生感染或插入突变带来的潜在风险。各种修饰技术帮助mRNA提高了稳定性与可翻译性，新的递送方法让mRNA可以快速进入到细胞中完成表达。此外这些新技术新方法也为其安全性提供了进一步保障。通过体外转录技术，mRNA可以被快速、大量地合成，让mRNA也同时具备了生产优势。

Takara mRNA疫苗研究方案，为mRNA疫苗不同阶段研究提供丰富的研发工具，助力疫苗研究工作提质增效。

mRNA体外合成相关产品一览

mRNA体外合成

生产mRNA主要通过体外合成方式进行，体系中RNA聚合酶以DNA为模板体外转录得到mRNA。Takara提供多种mRNA合成工具酶及相关试剂，包括各种聚合酶、修饰酶及系统化合成工具。

Takara IVTpro™ 高质量、高产量mRNA体外转录试剂盒

货号	产品名称	规格
6141	Takara IVTpro™ mRNA Synthesis System	1 Kit
6143	Cloning Kit for mRNA Template	10 Rxns
6144	Takara IVTpro™ T7 mRNA Synthesis Kit	20 Rxns
6146	Template Vector (BspQ I) for T7 mRNA Synthesis	10 μl

Cloning Kit for mRNA Template（6143）为用户提供预线性化的DNA模板制备载体，已包含T7启动子、转录起始序列（AGG）、5’－UTR、3’－UTR以及105-base Poly(A)序列。Cloning Kit整合了Takara In-Fuison^®无缝克隆技术，高效快速地帮助用户完成mRNA体外转录所需的DNA模板制备工作。
Takara IVTpro™ T7 mRNA Synthesis Kit（6144）为用户提供了mRNA体外合成所需的体系组分，包括Takara最新推出的T7 RNA聚合酶 — T7 RNA Polymerase ver.2.0（2541A），以及反应后消化模板所需的DNaseⅠ、纯化mRNA所需的LiCl溶液。另外，独立包装的NTPs便于修饰NTPs替换。本品配合CleanCap Reagent AG（TriLink公司的5’帽类似物），可高效制备含5’帽子结构的mRNA。每次反应（20 μl体系）可合成高达200 μg或更多mRNA。※5’帽类似物不包含在本产品中。
Takara IVTpro™ mRNA Synthesis System（6141）包含Cloning Kit for mRNA Template（6143）和Takara IVTpro™ T7 mRNA Synthesis Kit（6144）各一个。
Template Vector (BspQ I) for T7 mRNA Synthesis（6146）为预线性化的带有BspQ I酶切位点的DNA模板质粒。已包含T7启动子、转录起始序列（AGG）、5’-UTR、 3’-UTR、以及105-base Poly(A)序列。配合Takara In-Fusion^®Snap Assembly Master Mix（638947），能高效快速地帮助用户完成mRNA体外转录所需的DNA模板制备工作。使用IIS型限制酶BspQ I（1227A）消化，可得到Poly(A)尾无冗余序列的mRNA线性化质粒模板，提高mRNA的翻译效率。搭配Takara IVTpro™ T7 mRNA Synthesis Kit（6144）即可进行mRNA的体外合成。

货号	产品名称	规格
2460A	Vaccinia Capping Enzyme	500 U
2460B	Vaccinia Capping Enzyme	2,000 U
2470A	mRNA Cap 2'-O-Methyltransferase	2,500 U
2470B	mRNA Cap 2'-O-Methyltransferase	10,000 U
2540A	T7 RNA Polymerase	5,000 U
2540B	T7 RNA Polymerase	5,000 U ×5
2541A	T7 RNA Polymerase ver.2.0	20,000 U
2542A	T7 RNA Polymerase, HQ	200,000 U
2560A	PrimeCap™ T7 RNA Polymerase (low dsRNA)（单酶）	20,000 U
2520A	SP6 RNA Polymerase	3,000 U
2520B	SP6 RNA Polymerase	3,000 U ×5
2181	Poly(A) Polymerase	20 U
2450A	Pyrophosphatase (inorganic)	10 U
2450B	Pyrophosphatase (inorganic)	10 U ×5
2451A	Pyrophosphatase (inorganic), HQ	1,000 U
2270A	Recombinant DNase I (RNase-free)	1,000 U
2270B	Recombinant DNase I (RNase-free)	1,000 U ×5
2313A	Recombinant RNase Inhibitor	5,000 U
2313B	Recombinant RNase Inhibitor	5,000 U ×5
2315A	Recombinant RNase Inhibitor ver.2.0	5,000 U
2315B	Recombinant RNase Inhibitor ver.2.0	5,000 U ×5
1227A	BspQ I	500 U
1227B	BspQ I	500 U ×5
1093A	XbaⅠ	3,000 U ×5
1093AH	XbaⅠ，高浓度	3,000 U

点击下方链接查看丰富的限制性内切酶系列产品：

常规限制酶系列产品、QuickCut限制酶产品

mRNA转染

进行动物实验前，将mRNA转染细胞是初步验证所合成的mRNA是否有效的方法之一。Takara Xfect RNA转染试剂可以高效转染多种类型RNA至哺乳动物细胞，是包含转染所需全部试剂的完整系统。

货号	产品名称	规格
631450	Xfect RNA Transfection Reagent	1.2 ml

Xfect是可生物降解的纳米颗粒高分子聚合物转染试剂，可提供更低的细胞毒性和高转染效率，适用于广泛的细胞类型，保证高转染效率的同时保持了更高的细胞活性。

实验例

图1. HeLa细胞与间充质干细胞（MSCs）转染GFP mRNA。HeLa细胞（2.0×105）和间充质干细胞（6.0×104）使用1 μg GFP mRNA和5 μl Xfect RNA转染试剂进行处理。20小时后，通过落射荧光显微镜进行观察。HeLa细胞图像20倍放大，间充质干细胞图像40倍放大。

转染细胞中目标蛋白表达检测（Western Blot分析）

Western Blot分析仍然是目前实验室常用的检测分析方法之一，广泛应用于对目标蛋白质的检测与分析。转染细胞后的mRNA会获得怎样的表达情况，通过Western Blot检测可以获得一目了然的结果。Takara提供丰富的Western Blot实验相关试剂，搭配详细的实验操作指南，提高Western Blot实验效率。

化学发光检出用HPR底物

货号	产品名称	规格
T7101A	Western BLoT Chemiluminescence HRP Substrate	250 ml
T7101B	Western BLoT Chemiluminescence HRP Substrate	250 ml × 2
T7102A	Western BLoT Quant HRP Substrate	100 ml

抗原-抗体反应促进

货号	产品名称	规格
T7111A	Western BLoT Immuno Booster	250 ml each
T7115A	Western BLoT Immuno Booster PF	250 ml

HPR标识二抗替代

货号	产品名称	规格
T7122A	Western BLoT Rapid Detect v2.0	50 Rxns

封闭与洗脱

货号	产品名称	规格
T7131A	Western BLoT Blocking Buffer（Fish Gelatin）	1 L
T7132A	Western BLoT Blocking Buffer（Protein Free）	500 ml
T7135A	Western BLoT Stripping Buffer	500 ml

电泳缓冲液方便装与蛋白质Marker

货号	产品名称	规格
3453A	CLEARLY Protein Ladder (Unstained)	500 μl
3454A	CLEARLY Stained Protein Ladder	500 μl
T9320A	TaKaRa CBB Protein Safe Stain	1 L

Western Blot实验操作指南

病毒RNA检测

动物实验是检验疫苗效果的重要一环。这其中少不了对不同实验组别动物体内病毒载量的检测。除了经典的组织病理学、免疫组化方法外，快速、灵敏的荧光定量PCR方法同样不可少。Takara提供高质量的病毒核酸检测相关产品，加速研究进程。

探针法一步RT-PCR试剂与病毒核酸提取

货号	产品名称	规格
RR064A	One Step PrimeScript™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time)	100 Rxns
RR064B	One Step PrimeScript™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time)	100 Rxns × 5
RR600A	One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix	200 Rxns
RR600B	One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix	200 Rxns × 5
9766	TaKaRa MiniBEST Viral RNA/DNA Extraction Kit Ver.5.0	50 Rxns

【文献案例】

· Huang, Qingrui, et al. “A Single-Dose MRNA Vaccine Provides a Long-Term Protection for HACE2 Transgenic Mice from SARS-CoV-2.” Nature Communications, vol. 12, no. 1, 2021, pp. 776–776.
· Zhang, Na Na, et al. “A Thermostable MRNA Vaccine against COVID-19.” Cell, vol. 182, no. 5, 2020, pp. 1271–1283.
· Zhang, Cheng, et al. “Impact of Prior Infection on Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2 Transmission in Syrian Hamsters.” Frontiers in Microbiology, vol. 12, 2021, pp. 722178–722178.

疫苗的研发是一场与病毒的赛跑。科技不断发展，技术不断进步，人类的脚步从未停止向前。mRNA疫苗以及更多基于mRNA技术的治疗方法将为人类的健康以及公共卫生安全事业持续贡献力量

Takara为不同基因工程疫苗研究提供多种解决方案，点击下方专题，了解更多信息。
《重组腺病毒疫苗研究解决方案》
《重组蛋白疫苗研究解决方案》

参考文献

· Wolff, Jon A., et al. “Direct Gene Transfer into Mouse Muscle in Vivo.” Science, vol. 247, no. 4949, 1990, pp. 1465–1413.
· Pardi, Norbert, et al. “mRNA Vaccines — a New Era in Vaccinology.” Nature Reviews Drug Discovery, vol. 17, no. 4, 2018, pp. 261–279.
· Karikó, Katalin, et al. “Incorporation of Pseudouridine into mRNA Yields Superior Nonimmunogenic Vector with Increased Translational Capacity and Biological Stability.” Molecular Therapy, vol. 16, no. 11, 2008, pp. 1833–1840.
· Kauffman, Kevin J., et al. “Materials for Non-Viral Intracellular Delivery of Messenger RNA Therapeutics.” Journal of Controlled Release, vol. 240, 2016, pp. 227–234.
· Guan, S., and J. Rosenecker. “Nanotechnologies in Delivery of mRNA Therapeutics Using Nonviral Vector-Based Delivery Systems.” Gene Therapy, vol. 24, no. 3, 2017, pp. 133–143.
· Thess, Andreas, et al. “Sequence-Engineered mRNA Without Chemical Nucleoside Modifications Enables an Effective Protein Therapy in Large Animals.” Molecular Therapy, vol. 23, no. 9, 2015, pp. 1456–1464.
· Karikó, Katalin, et al. “Generating the Optimal mRNA for Therapy: HPLC Purification Eliminates Immune Activation and Improves Translation of Nucleoside-Modified, Protein-Encoding mRNA.” Nucleic Acids Research, vol. 39, no. 21, 2011.

页面更新：2024-03-20 13:12:07