| 人iPS细胞培养 | ||||||||||||
| 人诱导多能干细胞（induced pluripotent stem cells，iPSCs) 由体细胞去分化重编程获得，具备与胚胎干细胞（Embryonic stem cell，ESCs）相似的多向分化潜能和自我更新能力，同时可完全保留供体（疾病、健康）的遗传背景。iPS细胞避开了胚胎干细胞可能面临的伦理道德方面的“牵绊”，加上有诺贝尔生理学或医学奖光环的“加持”，深受科研和医疗领域研究者的“青睐”。人iPS细胞结合基因编辑技术，可以制备出各种各样组织类型的、具有患者特异性或疾病特异性的人体细胞，作为体外细胞模型应用于疾病发病机制研究和药物研发筛选等工作，即“iPS derived disease model in a dish”。
传统的人iPS细胞（和人ESCs）培养呈现集落状生长，需要操作人员具备一定的实验技巧和熟练程度，特别是在传代培养时，如果分离接种的集落太大，容易出现分化，集落太小，又容易出现死亡。而且在基因编辑等操作后，为了分离和筛选感兴趣的基因型，单细胞必须被分离并扩增为克隆细胞系，但是对于集落状生长的iPS细胞，一旦涉及单细胞相关的分离和操作，其细胞活力和多能性都面临巨大挑战。 Takara提供新型的DEF-CS培养系统（Y30010），支持人iPS细胞（和人ESCs）在无血清、无饲养层条件下培养，可以实现稳健增殖并维持良好的干细胞多能性。区别于传统的培养方法，All-In-One型的DEF-CS系统支持新型的非集落状生长，可以轻松进行单细胞传代，干细胞培养小白也可以很快上手，更重要的是DEF-CS培养系统可以有效支持单个iPS细胞的存活和扩增，规避了集落状培养带来的挑战和困难(Asplund et al. 2016)。Takara同时开发了单克隆版本的DEF-CS培养系统（Y30021），可以更好的支持基因编辑等操作后人iPS细胞单克隆的形成和扩增。 |
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| Takara提供适合于更多应用场景的DEF-CS培养系统，包括无异源物质（Xeno-free）级别版本（Y30045）、3D培养版本（Y30047）、GMP培养版本（Y30071），可以支持人iPS细胞从基础培养阶段向工业化开发和临床应用阶段过渡。 | ||||||||||||
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| 人iPS细胞培养相关学习资料如下，不断更新中，欢迎随时查看或下载！ | ||||||||||||
| 1. 技术资料（Technical notes） | ||||||||||||
| · Using the DEF-CS system to culture human iPS cells 说明：新型的人iPS细胞生长模式，单层非集落、高度同质化。 |
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| · Direct comparison of the Cellartis DEF-CS system with different vendors' systems for culturing human pluripotent stem cells 说明：几大培养系统性能比对，Takara DEF-CS系统优势明显。 |
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| · Single-cell cloning of hiPS cells 说明：攻克难关，Takara DEF-CS系统应用于iPS细胞单克隆构建。 |
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| · Reprogramming of human PBMCs using Sendai virus and the Cellartis DEF-CS 500 Culture System 说明：高成功率，Takara DEF-CS系统应用于外周血单核细胞（PBMCs）重编程。 |
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| · Reprogramming of human fibroblasts using Sendai virus and the Cellartis DEF-CS 500 Culture System 说明：高成功率，Takara DEF-CS系统应用于成纤维细胞重编程。 |
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| · Gene editing in hiPS cells by using electroporation or gesicle technology 说明：完整解决方案，Takara DEF-CS系统应用于iPS细胞基因编辑。 |
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| 2. 实验方案（Protocols） | ||||||||||||
| · Cellartis DEF-CS Culture System User Manual 说明：详细使用手册，教你使用Takara DEF-CS系统进行人iPS细胞培养（复苏、换液、传代、冻存）。 |
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| · Transferring iPSCs from other feeder-free culture systems to the DEF-CS culture system 说明：内含小技巧，来自其他无饲养层法培养的iPS细胞也可以成功适应新型的Takara DEF-CS系统。 |
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| · Transferring iPSCs on MEFs to the DEF-CS culture system 说明：内含小技巧，来自饲养层法培养的iPS细胞也可以成功适应新型的Takara DEF-CS系统。 |
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| · Confirmation of pluripotency by spin embryoid body formation 说明：教你一招，利用拟胚体法鉴定干细胞多能性。 |
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| · Reprogramming fibroblasts using the Cellartis DEF-CS 500 Culture System 说明：步骤详解，利用仙台病毒重编程成纤维细胞。 |
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| · Reprogramming peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) using the Cellartis DEF-CS 500 Culture System 说明：步骤详解，利用仙台病毒重编程外周血单核细胞（PBMCs）。 |
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| · Video protocol: Culturing & editing human iPSCs with CRISPR/Cas9 and single-cell cloning 说明：视频演示，看看Takara如何进行人iPS细胞培养和（电穿孔法）基因编辑实验。 |
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| 3. 讲座音频（Webinars） | ||||||||||||
| · Edited hiPS cell lines for disease modeling 说明：主讲人Montse Morell博士，人iPS细胞创建疾病模型的挑战及解决方案。 |
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| 4. 常见问答（FAQs） | ||||||||||||
| · Cellartis DEF-CS 500 Culture System FAQs 说明：Takara DEF-CS培养系统答疑时间，产品相关6个+操作相关6个。 |
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| 5. 文献案例（Citations） | ||||||||||||
| · Cellartis DEF-CS 500 Culture System citation list 说明：Takara DEF-CS培养系统发表文献集合，涉及基础、转化、临床前、生物医药等研究领域。 |
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| 6. 学术海报（Posters） | ||||||||||||
| · Footprint-free gene editing using CRISPR/Cas9 and single-cell cloning of edited human iPS cells 说明：完整工作流程，低脱靶效应的人iPS细胞基因编辑和编辑后单细胞克隆培养。 |
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| 延伸阅读： | ||||||||||||
| 1. 单个干细胞基因操作实验的理想选择 2. 科研版“PPAP”：iPSC基因编辑 3. #围观# 平平无奇的“人iPS细胞-疾病模型”制备小天才！ 4. 人iPS细胞基因编辑解决方案 5. 人iPS细胞应用于疾病模型研究解决方案 |
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页面更新：2021-09-06 11:43:07
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