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■ 制品说明 |
iDimerize技术可以通过化学诱导DNA结合结构域和转录激活结构域的二聚化来严格控制靶基因的转录激活。使用iDimerize方法用于转录调控的一个关键优势是它的低背景,因为在添加二聚体配体之前,转录激活结构域(activation domain, AD)是与DNA物理分离的。
转录因子是一种双功能蛋白质,它可以识别靶基因附近的特定DNA序列(通过DNA结合结构域),然后招募细胞的转录机制来激活转录过程(通过转录激活结构域)。虽然这两个结构域是作为单独的蛋白质表达并由A/C异源二聚体配体结合在一起的,但是它们仍然可以一起工作来激活转录过程。 |
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A/C Heterodimerizer Ligand |
A/C异源二聚体是一种人工合成的细胞渗透性配体,可用于诱导两种融合蛋白质的异源二聚化。例如,当与本试剂盒(Code No. 635081)一起使用时,A/C异源二聚体可诱导DmrC标记的转录AD与DmrA标记的DNA结合结构域发生二聚化反应。 |
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调控转录过程 |
依次转染您感兴趣的细胞:
1. 表达转录激活结构域和DNA结合结构域的质粒(pHet-Act1-2)
2. 您感兴趣的基因克隆在PZI-1可诱导启动子的下游(pZFHD1-2) |
DNA结合部分始终与启动子结合,但只有通过DmrA和DmrC结构域与转录激活部分相互作用,才能激活转录。当加入A/C异源二聚体时,两种组分相互作用,您感兴趣的基因就会从PZI-1启动子转录出来。 |
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■ 制品特点 |
1. 应用iDimerize技术严格调控转录过程
2. 通过剂量依赖性小分子调控转录过程
3. 在加入二聚体配体之前,激活结构域与DNA物理分离,实现低背景 |
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■ 制品应用 |
1. 以配体依赖的方式诱导基因表达
2. 分析促进细胞死亡、阻断细胞周期或其他有毒的基因
3. 功能基因组学研究 |
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■ 保存 |
-20℃ |
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■ 参考文献 |
Pomerantz, J. L., Sharp, P. A., & Pabo, C. O. Structure-based design of transcription factors. Science 267(5194), 93-96 (1995). |
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