· 完整的BCR分析:支持分析重链(IgG, IgM, IgA, IgD, IgE) 和轻链 (IgK, IgL)
· 灵活的样本起始条件:支持10 ng - 1 μg 小鼠脾脏、骨髓、淋巴结、全血以及PBMC来源的高质量RNA起始(RIN>7)
· 简化的操作流程:组分中的重、轻免疫球蛋白链引物以及酶均是预混形式
· 更可靠测序数据:SMARTer Oligo上引入UMI,用于校正测序错误和PCR偏差
· 灵活的测序平台选择:可自由选择V(D)J全长分析,或只分析CDR3 |
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■ 产品说明 |
SMART-Seq Mouse BCR (with UMIs)是一款小鼠BCR NGS文库构建试剂盒。该试剂盒整合SMART(Switching Mechanism at 5' end of RNA Template)全长cDNA合成技术与5’RACE技术,可捕获重链(IgA/D/E/G/M) 和轻链 (IgK/L)基因完整的V(D)J可变区,用于后续NGS分析。
该试剂盒支持不同起始量的RNA(RIN>7)起始,均可获得高品质的测序文库。比如小鼠脾脏、骨髓或者外周血单核细胞(PBMC)纯化的10 ng-1 μg的总RNA,也支持从小鼠血液或者淋巴结中提取的RNA样本。
该试剂盒中的重、轻免疫球蛋白链引物以及酶均是预混形式,减少了试剂组分数量和操作步骤。另外该试剂盒还包括特别的分子条形码(UMI),可以消除PCR错误或duplication以及测序偏向,从而确保获得更准确和可靠的结果。此外,搭配使用的双端特殊index(UDI,Unique Dual Index),可以提供完整的从样品到文库构建的实验体验。
该试剂盒所建文库支持更多样的测序平台。既支持Miseq平台(分析V(D)J全长信息),也支持其它Illumina平台(分析CDR3区),节约成本。
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■ 应用 |
· 用于分析组织和循环系统中的B细胞的克隆组织和多样性,了解它们如何影响B细胞的分化途径和功能。
· 发现具有高亲和力的BCR,以便更好地为疫苗接种或传染病治疗提供指导。
· 追踪抗原特异性B细胞在HIV以及其他疾病的小鼠模型中过继转移后的变化和迁移。
· 检查BCR序列,以研究针对新表位的自体抗体随时间的变化,以及这些变化如何与严重的自身免疫疾病相关联,如狼疮。 |
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■ 建库原理 |
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