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SMART-Seq® Total RNA Pico Input with UMIs (ZapR Mammalian)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 634354 SMART-Seq® Total RNA Pico Input with UMIs (ZapR Mammalian) 24 Rxns ¥18,658
Clontech 634355 SMART-Seq® Total RNA Pico Input with UMIs (ZapR Mammalian) 96 Rxns ¥52,243
Clontech 634356 SMART-Seq® Total RNA Pico Input with UMIs (ZapR Mammalian) 4 × 96 Rxns ¥189,454
Clontech 634756 Unique Dual Index Kit (1–24) 24 Rxns ¥2,737
Clontech 634752 Unique Dual Index Kit (1–96) 96 Rxns ¥7,370
Clontech 634753 Unique Dual Index Kit (97–192) 96 Rxns ¥7,370
Clontech 634754 Unique Dual Index Kit (193–288) 96 Rxns ¥7,370
Clontech 634755 Unique Dual Index Kit (289–384) 96 Rxns ¥7,370
带UMI的微量样本的链特异RNA-Seq分析
SMART-Seq® Total RNA Pico Input with UMIs (ZapR Mammalian)
· 高灵敏度:可以人、大鼠或小鼠来源的250 pg-10 ng的总RNA或10-1000个细胞起始
· 添加UMI:准确识别真正变异和罕见突变,并校正来自PCR和测序错误以及重复序列
· 用途广泛:能分析质量较差的FFPE、LCM以及cfRNA来源的样本,生成高再现性的数据
· 操作简便:仅需要6.5小时即可完成文库构建,改良buffer配方,缩短文库纯化时间
 
注:SMART-Seq Total RNA Pico Input with UMIs (ZapR Mammalian) 是SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v3 - Pico Input Mammalian的替代品,性能提升,如下所示:
 
i:提升ZapR技术去除rRNA cDNA效率,以更好地剔除不需要的reads信息
ii:试剂盒中不再包含index,但可以与Unique Dual Index (UDI) kits(24 Rxns,96 Rxns)灵活地搭配使用
 
■ 产品说明
SMART-Seq Total RNA Pico Input with UMIs (ZapR Mammalian) 设计用于从皮克级总RNA (250 pg-10 ng) 中高效制备Illumina测序文库。本试剂盒适用于高品质、部分降解及低品质RNA(如来自于FFPE或LCM样品)。本试剂盒采用一体化操作流程,保留了链来源信息,在反转录和PCR扩增过程中就可以添加indexes和接头。本试剂盒设计在反转录步骤增加8 nt UMI(Unique molecular identifier),以降低PCR偏倚,并为转录本定量提供额外的信息,特别是对于真正的变异和罕见的突变。
该试剂盒结合了SMART(Switching Mechanism at the 5' end of RNA Template)技术,包括对链特异性RNA-Seq的SMART方法进行改良,简化了文库制备流程并提升了测序性能。该方法可用于高质量或低质量的总RNA,不需要前处理rRNA,并且生成的是保留链来源信息的测序文库。整合了去除核糖体RNA来源的cDNA(以total RNA起始生成的cDNA中呈高丰度)流程,使得操作流程非常灵敏,生成的数据再现性高,rRNA比对率低。
全部操作流程,包括文库准备和纯化,只需要大约6.5 h。
 
不同样品起始量解决方案
·10-100 ng总RNA,推荐使用SMART-Seq Total RNA Mid Input
·100 ng-1 μg总RNA,推荐使用SMART-Seq Total RNA High Input (RiboGone Mammalian)
 
■ 流程概要
 
■ 性能数据
小鼠脑总RNA-seq文库的转录组分析
选择250 pg的小鼠脑RNA样本起始,使用SMART-Seq Total RNA Pico Input with UMIs制备文库。之后分别采用ZapR Mammalian rRNA Depletion Kit试剂盒中的模块处理(+)和未处理(-),然后通过PCR扩增进行富集或者不进行处理。最后使用CogentAP 对3x106 PE reads进行数据分析。
Panel A的柱状图和Panel C的表格数据展示了文库的reads分布,Panel B的柱状图和Panel C展示了文库基因检测数等数据
 
原代B细胞来源的Total RNA转录组分析
选择10 ng的人原代B细胞来源的Total RNA样本起始,使用SMART-Seq Total RNA Pico Input with UMIs制备文库。之后分别采用ZapR Mammalian rRNA Depletion Kit试剂盒中的模块处理(+)和未处理(-),然后通过PCR扩增进行富集或者不进行处理。最后使用CogentAP 对3x106 PE reads进行数据分析。
Panel A的柱状图和Panel B的表格数据分别展示了用ZapR Mammalian rRNA Depletion Kit处理(+)和未处理(-)的文库基因检测数和转录本检测数
 
降解FFPE样本起始,可有效去除rRNA来源cDNA,获得可靠的结果
使用本试剂盒制备10 ng FFPE RNA文库 (RIN=3, DV200=77%)。使用CogentAP进行数据分析,使用3x106 PE reads进行数据分析。
Panel A的柱状图和Panel B的表格数据,展示了文库的reads分布和基因组检测数
 
提升ZapR技术去除rRNA cDNA 效率
选择250 pg的人脑RNA样本起始,使用SMART-Seq Total RNA Pico Input with UMIs制备文库。之后分别采用ZapR Mammalian rRNA Depletion Kit试剂盒中的模块处理(+)和未处理(-),然后通过PCR扩增进行富集或者不进行处理。同时,使用SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v3 - Pico Input Mammalian对250 pg的人脑RNA样本制备文库。最后使用CogentAP 对3x106 PE reads进行数据分析。
与SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v3 - Pico Input Mammalian制备的文库相比,SMART-Seq Total RNA Pico Input with UMIs (ZapR Mammalian)制备的文库,rRNA相关reads百分比降低,外显子reads百分比增加。
 
 
产品详情请点击:
 
 

页面更新:2024-07-05 15:43:13