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基因编辑后突变检测
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 631443 Guide-it Mutation Detection Kit 100 Rxns ¥5,565
Clontech 631448 Guide-it Mutation Detection Kit 25 Rxns ¥2,485
无标题文档
 
 
            基因敲除    
        基因敲入     编辑效率检测 细胞基因型确认 Indel序列确认
sgRNA设计工具 sgRNA合成及筛选 Knockin模板制备 CRISPR-Cas9导入方法            
  基因敲入        
        *建议与重组Cas9
蛋白质搭配使用
  高通量SNP筛选        
 
 
Guide-it突变检测试剂盒可以用于确认由CRISPR/Cas9、锌指核酸酶(ZFNs)、转录激活因子样效应物核酸酶(TALENs)等工程核酸酶所导入的基因突变。本试剂盒采用简单的PCR方法即可简便快速地检测出基因突变。性能卓越的 Terra PCR Direct Polymerase Mix可直接以细胞为起始进行扩增,无需提取基因组DNA。扩增产物经过变性及退火处理后形成不完全匹配DNA,Guide-it解离酶会剪切错配DNA部分,之后通过琼脂糖凝胶电泳确认剪切产物。
 
■ 特点
· 识别哺乳动物细胞中插入或者缺失突变的简便方法
· 可直接以细胞为起始进行PCR扩增,与同类产品相比较更为快速有效
· 完整试剂盒: 包含Guide-it Resolvase、Terra PCR Direct Polymerase和所有缓冲液
· 规格: 可提供100次和25次反应规格,25次反应规格可用于小规模基因编辑实验
· 可用于CRISPR/Cas9、ZFNs、TALENs下游研究突变序列确认
 
■ 操作流程

 
■ 实验例
Guide-it Mutation Detection Kit 与其他公司同类产品的比较
 
    转染表达Cas9核酸酶的质粒和特异作用于AAVS1位点的sgRNA至293T细胞,转染48 hr 后收集细胞,将其与未经转染的细胞按照不同比例进行混合,分别进行突变导入检测。采用Terra PCR Direct Polymerase Mix扩增含有AAVS1位点的目的片段并纯化其产物,之后分别采用Guide-it解离酶和Cel1酶进行剪切。采用Guide-it解离酶剪切后条带清新易于识别,而Cel1酶剪切后则显示明显的弥散,这样使得不容易测定突变效率并且低水平突变导入很难检测得到。
 
    采用Guide-it解离酶剪切后的电泳结果图条带清晰,而采用Cel1酶剪切后弥散明显,这可能是由于剪切错配DNA的酶的性能差异所引起的。
→两者的检测灵敏度相差5倍以上。
 
 
■ 产品组份
  100 次(产品编号 631443) 25 次(产品编号 631448)
 Extraction Buffer 1 5 ml × 4    5 ml
 Extraction Buffer 2      2 ml 500 μl
 Guide-it Resolvase   100 μl  25 μl
 Terra PCR Direct Polymerase Mix (1.25 U/μl)   100 μl  25 μl
 2 × Terra PCR Direct Buffer (with Mg2+, dNTP) 1 ml × 3 750 μl
  PCR-Grade Water 1 ml × 5    1 ml
 
■ 保存
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■ 关联资料
Guide-it 突变检测试剂盒宣传页:
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