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基因敲除 |
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基因敲入 |
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基因敲入 |
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*建议与重组Cas9
蛋白质搭配使用 |
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Guide-it™突变检测试剂盒可以用于确认由CRISPR/Cas9、锌指核酸酶(ZFNs)、转录激活因子样效应物核酸酶(TALENs)等工程核酸酶所导入的基因突变。本试剂盒采用简单的PCR方法即可简便快速地检测出基因突变。性能卓越的 Terra™ PCR Direct Polymerase Mix可直接以细胞为起始进行扩增,无需提取基因组DNA。扩增产物经过变性及退火处理后形成不完全匹配DNA,Guide-it解离酶会剪切错配DNA部分,之后通过琼脂糖凝胶电泳确认剪切产物。 |
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■ 特点 |
· 识别哺乳动物细胞中插入或者缺失突变的简便方法
· 可直接以细胞为起始进行PCR扩增,与同类产品相比较更为快速有效
· 完整试剂盒: 包含Guide-it Resolvase、Terra PCR Direct Polymerase和所有缓冲液
· 规格: 可提供100次和25次反应规格,25次反应规格可用于小规模基因编辑实验
· 可用于CRISPR/Cas9、ZFNs、TALENs下游研究突变序列确认 |
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■ 操作流程 |

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■ 实验例 |
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Guide-it™ Mutation Detection Kit 与其他公司同类产品的比较
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转染表达Cas9核酸酶的质粒和特异作用于AAVS1位点的sgRNA至293T细胞,转染48 hr 后收集细胞,将其与未经转染的细胞按照不同比例进行混合,分别进行突变导入检测。采用Terra PCR Direct Polymerase Mix扩增含有AAVS1位点的目的片段并纯化其产物,之后分别采用Guide-it解离酶和Cel1酶进行剪切。采用Guide-it解离酶剪切后条带清新易于识别,而Cel1酶剪切后则显示明显的弥散,这样使得不容易测定突变效率并且低水平突变导入很难检测得到。 |
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采用Guide-it解离酶剪切后的电泳结果图条带清晰,而采用Cel1酶剪切后弥散明显,这可能是由于剪切错配DNA的酶的性能差异所引起的。 |
→两者的检测灵敏度相差5倍以上。 |
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■ 产品组份 |
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100 次(产品编号 631443) |
25 次(产品编号 631448) |
Extraction Buffer 1 |
5 ml × 4 |
5 ml |
Extraction Buffer 2 |
2 ml |
500 μl |
Guide-it Resolvase |
100 μl |
25 μl |
Terra PCR Direct Polymerase Mix (1.25 U/μl) |
100 μl |
25 μl |
2 × Terra PCR Direct Buffer (with Mg2+, dNTP) |
1 ml × 3 |
750 μl |
PCR-Grade Water |
1 ml × 5 |
1 ml |
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■ 保存 |
-20℃
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产品详情请点击: |
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■ 关联资料 |
Guide-it™ 突变检测试剂盒宣传页:
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